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液相色譜中影響峰擴散的6大因素？2023/07/26

氣相色譜與液相色譜在速率理論方程上的差異主要是由于氣體與液體的性質差異造成的。液體的黏度比氣體大約100倍，表面張力大約10000倍，密度大約1000倍；氣體還具有高壓縮性系數。溶質在液體中的擴散系數要遠遠小于在氣體中，液相在傳質過程中對理論塔板高度的影響尤其的大。與氣相色譜速率理論方程不同的是，液相色譜增加了固定相孔結構內滯留流動相傳質項。因此我們可以得知主要有以下幾個方面會影響色譜峰擴張：1.渦流擴散渦流擴散是由于柱填料粒徑大小不同及填充不均勻等因素造成的流動相在色譜柱內遷移過程中發生的渦流

液相色譜“雙峰”的5大原因2023/07/03

色譜雙峰指的是明明是同一種物質，但在色譜圖中卻呈現雙峰，讓實驗人員誤認為含有兩種物質。那么，出現雙峰的原因主要有哪些呢？今天小編就和大家聊一聊，液相色譜出現“雙峰”的原因。在HPLC分析中，在色譜柱正常，樣品濃度適宜，分析方法合適，色譜峰在出峰時間較短的條件下，峰型應對稱而尖銳。但在實際操作中，如果對樣品不了解，前處理不恰當或者分析方法不合理等，會出現峰形不正常的情況，其中雙峰現象就是液相色譜中常見的問題之一。出現色譜雙峰的原因一般有以下幾種原因：色譜柱的問題、溶劑、進樣量、樣品特性，以及pH。

液相色譜操作過程中的注意事項2023/05/17

液相色譜對于多數人來說都是很好上手的儀器了，但是就算是用過幾年、經驗豐富的分析員都會習慣于一些錯誤的操作（師傅教錯了嗎），經常導致一些儀器故障。方便快捷的分析過程固然重要，但是為了多做樣品而忽略了一些步驟，往往得不償失，哪些操作不能做？哪些懶兒不能偷？那些小概率的故障師傅沒教怎么辦？液相使用過程中有哪四大關鍵因素要注意？本文一一告訴你哦！流動相不過濾因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥，因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾，而常用的方法是濾過，

液相色譜使用秘訣須謹記！2023/04/11

液相色譜對于多數人來說都是很好上手的儀器了，但是就算是用過幾年、經驗豐富的分析員都會習慣于一些錯誤的操作（師傅教錯了？），經常導致一些儀器故障。方便快捷的分析過程固然重要，但是為了多做樣品而忽略了一些步驟，往往得不償失，哪些操作不能做？哪些懶兒不能偷？那些小概率的故障師傅沒教怎么辦？液相使用過程中有哪四大關鍵因素要注意？本文一一告訴你哦！一、流動相不過濾因為塵埃或其它任何雜質微粒都會磨損柱塞、密封環、缸體和單向閥，因此應預先除去流動相中的任何固體微粒。流動相最好在玻璃容器內蒸餾，而常用的方法是濾

如何排除色譜系統中的氣泡？2023/04/04

液相色譜總有氣泡怎么辦？總結起來可以分類7種原因，這里整理了7種故障原因及解決方法，一旦遇到這些故障可以對照進行解決。情況一溶劑混合時，由于兩種液體熱力學體積的變化，會產生氣泡；混合時放熱或者吸熱易產生氣泡，比如：甲醇和水混合屬于放熱，乙腈和水混合屬于吸熱。通常用量筒混合后明顯看到體積的增減，而且有許多小氣泡產生，掛在瓶壁上，或者晃一下可以看到許多小氣泡存在液體中。解決辦法：對溶劑過濾，超聲脫氣（常用），尤其是乙腈和水混合后，超聲脫氣時間要長一些，也可以通過其他方法脫氣，例如安裝在線脫氣機，充氮

分流進樣 or 不分流進樣？該如何選擇？2023/03/09

分流/不分流進樣口是毛細管柱氣相色譜法較常用的進樣口，它既可用作分流進樣，也可用作不分流進樣。分流進樣和不分流進樣在進樣口結構、襯管結構、操作參數的設置，以及對樣品的要求等都有區別。那么，究竟是選擇哪種進樣方式呢？從結構上看，分流/不分流進樣口有明顯的不同：一是前者有分流氣出口及其控制裝置，除了進樣口前有一個控制閥外，在分流氣路上還有一個柱前壓調節閥；二是使用的襯管結構不同。不分流襯管為直通型，而分流襯管內部多彎曲或內部另有裝置。此外，分流進樣和不分流進樣在操作參數的設置，對樣品的要求以及襯管結

保留時間不穩定漂移原因有很多2023/01/04

保留時間是色譜法的常用術語，是指被分離樣品組分從進樣開始到柱后出現該組分濃度極大值時的時間，當提到保留時間、死時間、調整保留時間時，你是否清楚？當涉及液相、氣相中保留時間波動時，你是否明白，本篇文章為你做出了概括！先區分幾個小概念保留時間(T)：從進樣開始到某個組分的色譜頂點的時間間隔稱為該組分的保留時間。即從進樣到柱后某組分出現濃度極大時的時間間隔。死時間(t)：分配系數為0的組分的保留時間稱為死時間。通常將空氣或者甲烷視為此種組分，用來測定死時間。調整保留時間（t）：某組分由于溶解（或者吸附

鬼峰產生的原因及解決辦法2022/12/08

什么叫鬼峰？在做液相色譜反相系統梯度洗脫時，有時會遇到儀器不進樣也有出峰的情況，這種峰影響定量結果，也可使分析工作無法進行，由于它神出鬼沒的特質，所以被稱為鬼峰。那我們就來了解下，鬼峰出現的可能原因及排除方法。在懷疑峰型異常是不是鬼峰時，我們首先可以通過仔細核查操作條件是否與分析方法一致，儀器工作狀態是否正常來看有無操作失誤，確定不是上述失誤后，儀器不進樣，或者進流動相，或者只運行方法看基線中是否還存在莫名的色譜峰來判斷是否為鬼峰。從鬼峰出現的頻率來看，一般來說，可以從兩個大方面進行考慮：流動相

色譜知識匯編整理（上篇）2022/11/16

本文共分為了四個部分：色譜法總論、氣相色譜法、高效液相色譜、質譜分析法，共涉及了104個色譜分析的相關知識點。因文章內容過長，將分為兩期內容供粉絲們查閱。色譜方法總論色譜分析法：色譜法是一種分離分析方法，它利用樣品中各組分與流動相和固定相的作用力不同(吸附、分配、交換等性能上的差異)，先將它們分離，后按一定順序檢測各組分及其含量的方法。色譜法的分離原理：當混合物隨流動相流經色譜柱時，就會與柱中固定相發生作用(溶解、吸附等)，由于混合物中各組分物理化學性質和結構上的差異，與固定相發生作用的大小、強

HPLC雜質檢驗方法的確定&驗證&檢驗！2022/10/11

原料藥中的雜質包括有機雜質（工藝和藥物相關的）、無機雜質和殘留溶劑。其中有機雜質就是一般我們所指的有關物質，是指在藥物生產過程/貯存中所引入/生成的起始物料、中間體、副產物、異構體、降解物、催化劑等1；藥物制劑的有關物質主要是指藥物自身的降解物以及藥物與輔料或包裝材料相容性產物等2。有關物質可能會具有不確定的毒性，甚至潛在的致癌、致畸、致突變等性質，因此需嚴格控制。國內外藥典中很多品種有關物質檢測方法通過峰面積比較的方法來確定是否符合規定，這種方法忽略了供試品溶液和對照品溶液的實際濃度，是一種x

7步*了解氣相色譜2022/09/22

對于一個未知樣品，首先要了解它的來源、性質、分析目的；在此基礎上，對樣品可有初步估計；再結合已知純物質或有關的色譜定性參考數據，用一定的方法進行定性鑒定。如何玩轉GC法分析樣品？1，樣品的來源和預處理方法GC能直接分析的樣品通常是氣體或液體，固體樣品在分析前應當溶解在適當的溶劑中，而且還要保證樣品中不含GC不能分析的組分(如無機鹽)，可能會損壞色譜柱的組分。因此在接到一個未知樣品時，必須了解來源，從而估計樣品可能含有的組分，以及樣品的沸點范圍。如果樣品體系簡單，試樣組分可汽化則可直接分析。如果樣

色譜分析方法偏離的限度：pH值&流速&柱溫&進樣量2022/08/29

摘要在色譜分析領域中，允許實驗室出于提高檢測性能與效率的需要，對標準方法或方法中規定的儀器操作條件進行調整，但不能超出一定的規定。超出一定的調整都視為方法變動。1、HPLC流動相的pH值流動相制備過程中，水溶性緩沖液pH值可在標準規定值的±0.2pH單位范圍內調整。2、HPLC緩沖液中鹽的濃度流動相制備過程中，如果pH值變化滿足要求，則水溶性緩沖液中鹽濃度可在±10%范圍內調整。3、HPLC流動相中各組分的比例流動相中組分的增減可以達到該組分在組成中所占比例的30%以上。流動相中占較高比例的組分

新色譜柱柱活化方法及維護注意事項2022/06/30

液相色譜的柱子通常分為正相柱和反相柱。正相柱大多以硅膠為柱，或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱;反相柱填料主要以硅膠為基質，在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團（ODS）稱為C18柱，其它常用的反相柱還有C8,C4,C2和苯基柱等。另外還有離子交換柱，GPC柱，聚合物填料柱等。色譜柱在使用前，最好進行柱的性能測試，并將結果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進行（出廠測試所使用的條件是最佳條件），只有這樣，測得的結果才有可比性。

原來 C18 柱有這么多選擇技巧！2022/06/14

在藥物分析中高效液相色譜法用得非常普遍,而色譜柱的選擇直接影響實驗結果與藥物的質量控制。不同C18色譜柱的保留行為千差萬別,選擇適宜的色譜柱對分析樣品至關重要。以C18色譜柱的內部化學鍵合相為切入點,介紹C18色譜柱的差異,并綜述在不同的pH環境、流動相極性、藥物極性等條件下以及根據色譜柱的分類系統選擇合適的鍵合相,為如何正確快速的選擇C18色譜柱提供參考。高效液相色譜（HPLC）法選擇性高、靈敏度高、分析速度快，而且大部分可以溶解的藥物能用該法分析，所以該技術已經成為藥物分析的方法。色譜柱是高

液相色譜柱堵了不要慌！2022/05/10

色譜柱堵了怎么辦？液相色譜儀的色譜柱在使用一段時間后，常會出現故障。液相色譜柱堵了，是很多分析朋友都遇到過的問題。那么碰到液相色譜柱堵了，怎么辦呢？不要慌，下面小編帶您了解一下液相色譜柱堵了的原因，及其解決方法。1、色譜柱“堵”的表現“堵”的表現現象就是柱壓異常升高，直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端，最主要原因就是流動相里有雜質，雜質的主要來源就是細菌。2、色譜柱“堵”的原因分析原因1：配制流動相時細菌污染首先我們要認識到，一般的國產甲醇其實不需要額外過濾處理，直接使用沒有

如何延長色譜柱使用壽命2022/04/14

一、使用在線過濾器我深信在線過濾器是HPLC或UHPLC儀器上有經濟效益的部件。在線過濾器放置在自動進樣器和色譜柱（或是保護柱）之間，常用的在線過濾器分為含有可替換篩板（0.5μm或0.2μm）的不銹鋼在線過濾器以及一次性的PEEK材質的在線過濾器，一般必須選擇比柱篩板孔徑更小的篩板，這樣才能有效攔截可能堵塞色譜柱篩板的顆粒。一旦發現儀器的壓力開始增加，可能在線過濾器篩板開始堵塞了，我們必須在其被*堵塞前更新。在線過濾器的功能就如同使用濾膜一樣，但是不需要任何額外的工作。使用離心機處理樣品后，還

HPLC基線漂移的影響因素2022/04/06

1.柱溫的影響柱溫的影響對于部分檢測器，尤其是示差折光檢測器或者高靈敏度的紫外檢測器，對于柱溫模塊的影響，通常導致的是基線有規律的上升和下降；處理方法中有一條，在進入檢測器前加上換熱器，不過換熱器是個什么東東，貌似并沒有用過。2.流動相不均勻這個原因導致的基線漂移通常是不規則的，與前一條柱溫的影響不同，流動相的污染或者不均勻會導致基線的升高，采用HPLC級別的溶劑或者高純度的鹽或添加劑，并對流動相進行脫氣可以解決流動相不均勻導致的基線漂移問題。3.檢測器流通池污染或有氣泡檢測器流通池的污染之前好

如何調整流動相實現提升分離度與改善峰形2022/03/11

昨天的分離度不太行呀，流動相要再調調！”這話是不是很熟悉？調調？！咋調？如果你還不知道如何配制合適的流動相瞅這里！秘訣1：由強到弱一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗，這樣可以很快地得到分離結果，然后根據出峰情況調整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。秘訣2：三倍規則每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量，保留因子約增加3倍，此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中，注意觀察各個峰的分離情況。秘訣3：粗調轉微調當分離達到一定程度，應將有機溶劑10%的改變量調整為5%

液相色譜柱的活化和保養2022/02/18

色譜柱是高效液相色譜儀最主要的部件，被測物質能否被很好的分離和測定，色譜柱的性能起著決定性的作用。因此，在日常工作中，應特別注意色譜柱的正確使用和維修保養，以延長色譜柱的使用壽命。01色譜柱的活化反相色譜柱：使用新的C18柱時，先用甲醇或乙腈沖洗20-30個柱體積，然后用甲醇/乙腈：水（50:50）沖洗10個柱體積，然后再用流動相平衡10-30柱體積正相色譜柱：新柱用流動相平衡20-30個柱體積離子色譜柱（SAX,SCX）：新柱先用甲醇或乙腈沖洗20個柱體積，然后轉換到流動相平衡Thermo部分

液相色譜“雙峰”原因解析2021/11/29

在HPLC分析中，在色譜柱正常，樣品濃度適宜，分析方法合適，色譜峰在出峰時間較短的條件下，峰型應對稱而尖銳。但在實際操作中，如果對樣品不了解，前處理不恰當或者分析方法不合理等，會出現峰形不正常的情況，其中雙峰現象就是液相色譜中常見的問題之一。色譜雙峰指的是明明是同一種物質，但在色譜圖中卻呈現雙峰，讓實驗人員誤認為含有兩種物質。出現色譜雙峰的原因一般有以下幾種：色譜柱如果在樣品分析時發現每個色譜峰都有雙峰出現，尤其在采用單一純物質時，則可以確定是色譜柱出現問題了，一般是柱頭受損或者柱頭固定相污染引