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目前檢測單個細胞特定細胞因子的表達手段包括：ELIspot、原位雜交、免疫細胞化學、限制性稀釋分析（limiting dilution analysis，LDA）和單細胞PCR，應用原位雜交技術和免疫組化方法觀察細胞因子蛋白表達及mRNA表達可以識別Th1和Th2細胞，此方法可獲得較強的細胞內信號，但此方法工作量大、主觀性強，難以進行大樣本檢測，且人肉眼識別能力有很大的局限性，而ELISPOT及單細胞PCR技術，技術性強、勞動強度大，難以進行廣泛推廣。隨著多標記及胞內細胞因子標記流式細胞技術的出現，使對細胞內細胞因子的研究推向了一個新的階段。下面主要對胞內細胞因子流式細胞技術作以介紹。

早期細胞因子表達與細胞功能相關性研究是基于特定克隆">克隆細胞的激活。盡管研究應用T淋巴細胞克隆">）與TH2（IL－4，IL－5，IL－10），但這些研究很難外推，因為T細胞克隆"g克隆證明了不同細胞因子的合成，如TH1（IL－2，IFN－>克隆與體內T細胞功能相關性還未被揭示。

快速：流式定量檢測細胞內細胞因子可在一天內完成，實驗流程需6-8小時，實際操作時間為1-2小時，快速簡便；

簡便：無需組織培養，可以全血分析，無需分離PBMCs；

靈敏度高：高度靈敏的熒光標記與檢測系統；

：可以在同一個細胞內同時檢測兩種或更多種細胞因子，也可根據細胞免疫表型區分分泌細胞因子的細胞的亞型，進行多參數相關分析；

安全：減少樣本處理與生物源性污染

接近生物體的分析條件：全血檢測保留細胞及生化微環境更準確反映了體內狀況。

二、所需儀器

1、流式上樣管及細胞培養皿或板

2、25%CO2，37℃孵箱

3、混勻振蕩器

4、離心機

5、加樣器、Tips

6、流式細胞儀

三、常用的標本類型和處理方法

全血：使用肝素鈉抗凝的真空采血管采血，不易采用肝素鋰、EDTA和ACD抗凝劑，血樣在8小時內分析，超過8小時會導致活性的損失，一般細胞因子陽性細胞會減少5%。如不能在8小時之內檢測，應將真空采血管水平室溫放置。