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　　大鼠P450膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450scc)ELISA試劑盒的實驗使用說明書主要包括以下內(nèi)容：

　　BS-3514  大鼠P450膽固醇側(cè)鏈裂解酶(P450scc)ELISA試劑盒

　　1. 實驗原理

　　該試劑盒采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。通過抗大鼠P450 scc單抗包被于酶標板上，標準品和樣品中的P450 scc與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗大鼠P450 scc，形成免疫復合物連接在板上。辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍色，最后加終止液硫酸，在450nm處測OD值，P450 scc濃度與OD值成正比，可通過繪制標準曲線求出標本中P450 scc濃度?。

　　2. 試劑盒組成

　　試劑盒包含以下組分(2-8℃保存)：

　　標準品液

　　生物素化的抗大鼠P450 scc

　　辣根過氧化物酶標記的Streptavidin

　　底物工作液

　　終止液硫酸?。

　　3. 樣本處理及保存

　　血清/血漿?：收集后2-8℃保存48小時，更長時間需冷凍(-20℃或-70℃)保存，避免反復凍融?。

　　細胞培養(yǎng)上清液/組織勻漿?：盡早檢測，保存條件同上?。

　　4. 實驗步驟

　　準備試劑?：將試劑移至室溫平衡至少30分鐘?。

　　加樣?：分別設(shè)標準品孔和待測樣本孔，每孔加標準品或待測樣本100μL，37℃溫育2小時?。

　　洗滌?：棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡2分鐘?。

　　加生物素標記抗體?：每孔加生物素標記抗體工作液100μL，37℃溫育1小時?。

　　加辣根過氧化物酶標記親和素?：每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液100μL，37℃溫育1小時?。

　　顯色?：每孔加底物溶液90μL，37℃避光顯色15-30分鐘?。

　　終止反應(yīng)?：每孔加終止溶液50μL，終止反應(yīng)?。

　　讀板?：用酶標儀在450nm波長測定各孔的OD值?。

　　5. 注意事項

　　避免直接接觸終止液和底物A、B，一旦接觸請盡快用水沖洗?。

　　實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品?。

　　使用一次性吸頭避免交叉污染?。

　　洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水?。

　　底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子;底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下?。

　　6. 結(jié)果計算

　　通過繪制標準曲線，根據(jù)OD值計算樣品中P450 scc的濃度?。

　　7. 適用范圍

　　該試劑盒適用于體外定量檢測血清、血漿或其他相關(guān)生物液體中P450 scc的濃度，僅用于科研實驗，禁用于臨床?。

　　以上內(nèi)容綜合了多個相關(guān)網(wǎng)頁的信息，確保實驗操作的準確性和安全性?。