薄膜過(guò)濾器操作步驟:
1.打開(kāi)預(yù)先滅菌的過(guò)濾器支架或?qū)⑦^(guò)濾器座、漏斗和漏斗蓋在沸水中浸沒(méi)一分鐘作消毒。若沒(méi)有沸水,用95%酒精噴灑于漏斗和漏斗蓋,然后將其點(diǎn)燃,在火熄滅以后,讓過(guò)濾器冷卻至40℃以下,如果必須使用酒精,漏斗必須用耐火材料制造。
2.用水煮過(guò)或火焰滅菌鉗子,將無(wú)菌過(guò)濾器的底座部分安裝于過(guò)濾燒瓶或真空管道上。
3.用火燒過(guò)的鑷子放一張無(wú)菌薄膜在過(guò)濾器底座上,根據(jù)測(cè)試目的,使用特定的過(guò)濾膜:總菌數(shù)/大腸桿菌數(shù):0.45um薄膜,酵母菌和霉菌:0.80um薄膜。
4.用水煮過(guò)或火焰滅菌鉗子,將過(guò)濾器漏斗和漏斗蓋放置于底座上。如漏斗蓋帶有管口,則在管口處裝上過(guò)濾器,或予以封住。待過(guò)濾器的溫度低于40℃后才可加樣品。
5.重復(fù)以上步驟,直到所有樣品都完成過(guò)濾。
6.將樣品直接倒入消毒和冷卻的過(guò)濾器漏斗中。蓋上過(guò)濾器漏斗的蓋子。若使用勺,須將勺放在95%的酒精的燒杯中。
7.打開(kāi)真空泵,使樣品通過(guò)薄膜。打開(kāi)裝有PH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液的玻璃瓶,先用火燒螺紋處,然后倒入約20毫升PH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液于過(guò)濾漏斗內(nèi),進(jìn)行沖洗。施加真空,使PH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液通過(guò)薄膜。在過(guò)濾完樣品或PH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液后,不要讓真空施加時(shí)間連續(xù)超過(guò)30秒以上。
8.用火焰滅菌鉗子從過(guò)濾器底座上取下薄膜。輕微提起裝有吸收墊和培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿的蓋子,并放下薄膜,直到鑷子相對(duì)側(cè)的薄膜邊靠到吸收墊邊為止。將薄膜貼在吸收墊上滾動(dòng),以排除氣泡。蓋上蓋子,在工作臺(tái)上輕輕拍打培養(yǎng)皿,以驅(qū)除薄膜下面的氣泡。
薄膜過(guò)濾器儀器清潔
將過(guò)濾器支架或過(guò)濾器座、漏斗和漏斗蓋、濾芯用純化水清洗干凈。使用前進(jìn)行高溫滅菌。
薄膜過(guò)濾器注意事項(xiàng)
1.試驗(yàn)過(guò)程中,應(yīng)保持濾膜前后的完整性。
2.使用前,必須對(duì)過(guò)濾器進(jìn)行潔凈處理,所選濾膜應(yīng)浸泡過(guò)夜。
3.消毒時(shí)將濕態(tài)膜貼在支撐板上,蓋上密封墊圈,將貯液杯和支座螺紋稍旋緊,待消毒后在旋緊,以紗布包裹進(jìn)行熱壓消毒,以免微孔濾膜破裂。
4.器蓋上有孔,可套針頭過(guò)濾器用以過(guò)濾外界空氣,以免污染。
5.本品不耐酸、堿及其他化學(xué)品。
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