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液相色譜儀的維護保養(yǎng)及氣泡問題的處理

來源:杭州庫侖科技有限公司   2014年02月21日 13:25  
     液相色譜儀的維護保養(yǎng): 
  1.HPLC的日常操作條件:
  溫度:10—30℃;
  相對濕度<80%;
  是恒溫、恒濕,遠離高電干擾、高振動設備。
  2.泵的保養(yǎng):
  1)使用流動相盡量要清潔;
  2)進液處的沙芯過濾頭要經(jīng)常清洗;
  3)流動相交換時要防止沉淀;
  4)避免泵內堵塞或有氣泡;
  3.進樣器的保養(yǎng):
  1)每次分析結束后,要反復沖洗進樣口,防止樣品的交叉污染;
  4.柱的保養(yǎng):
  1)柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強烈震動;
  2)當柱子和色譜儀聯(lián)結時,閥件或管路一定要清洗干凈;
  3)要注意流動相的脫氣;
  4)避免使用高粘度的溶劑作為流動相;
  5)進樣樣品要提純;
  6)嚴格控制進樣量;
  7)每天分析工作結束后,要清洗進樣閥中殘留的樣品;
  8)每天分析測定結束后,都要用適當?shù)娜軇﹣砬逑粗?
  9)若分析柱長期不使用,應用適當有機溶劑保存并封閉;
  5.檢測器(UV)的保養(yǎng):
  1)紫外燈的保養(yǎng):在分析前、柱平衡得差不多時,打開檢測器;在分析完成后,馬上關閉檢測器。
  2)樣品池要保養(yǎng)。
  液相色譜儀在使用中整個液路系統(tǒng)有兩個地方易產(chǎn)生氣泡:
  1、泵頭吸液白管。
  2、檢測口流通池。
  氣泡產(chǎn)生的原因:溫度上升,壓力下降!
  溫度上升或柱溫上升,當接近試劑沸點時,試劑汽化產(chǎn)生氣泡,試劑中已含微小氣泡,因加熱變大而產(chǎn)生氣泡。
  壓力下降產(chǎn)生氣泡,流動相中一直包含微小氣泡,無論超聲過濾,均不能池底去掉它,那么當壓力下降時,微小氣泡將長大,且多個小氣泡易聚集成大氣泡,而影響正常實驗。
  下面分部位說明氣泡產(chǎn)生原因及解決辦法:
  一、泵頭及吸液白管。
  1、泵頭:泵頭是壓力變化zui劇烈的地方,也是zui易產(chǎn)生氣泡的地方,泵頭靠負壓而吸液,而負壓必然使流動相中的小氣泡長大,當泵腔變正壓時,已長大的氣泡未必能全部變小流入后續(xù)液路,則泵腔內將積存氣泡,從而影響吸液精度,鑒于此,泵頭上專門設計了排氣閥,便于泵頭排氣,觀察柱壓穩(wěn)定了說明泵頭排氣成功。
  2、吸液白管長氣泡。
  a、吸液白管接觸空氣部位漏氣,產(chǎn)生可見氣泡,吸液白管是常壓和負壓交臂變化部位,其漏表現(xiàn)為大氣進入白管內,而不易見到管內液體漏出。
  處理方法:更換白管。
  b、濾頭堵:濾頭堵使得液體流入濾頭的速度下降,泵強制吸液而產(chǎn)生真空氣泡。
  判斷:拔掉濾頭不再長氣泡則是濾頭堵。
  處理:A、30%硝酸水液超洗濾頭,20分鐘左右。
  B、水超洗濾頭,注意換水多超幾次。
  c、流動相汽化產(chǎn)生氣泡。
  尤其是夏天室溫高,沸點低的試劑易汽化,比如:乙酸,**,氨水,石油醚等易于汽化。
  處理:超聲,降室溫。
  二、檢測流通池長氣泡。
  流通池是易積存氣泡的地方,其對基線影響巨大,流動相流入色譜柱后,壓力越來越小,微小氣泡將逐漸長大,而流通池截面積遠大于鋼管面積,則氣泡在池內易長大,氣泡的特點是長大在無外壓的情況下,很難縮小到鋼管內經(jīng)以下流出流通池,所以它就存在了池內。
  處理方法:1、對于示差檢測器(示差檢測器池只能耐幾個公斤壓力),只能是反復沖洗斥資,舉高廢液瓶靠廢液管內液柱給池加一個微小反壓,所以這就靠成了示差池子排氣困難些,但無它法。
  三、我公司紫外檢測器池內氣泡排除,當基線很亂,無規(guī)則時,應考慮池子排氣泡。
  1、反復調節(jié)反壓器壓力,直至基線穩(wěn)定。
  2、手工排氣泡步驟。
  a、取下反壓器,接上備用鋼管。
  b、泵吸液,檢測器調零。
  c、在現(xiàn)柱壓基礎上加一個50KG壓力上限保護,比如,現(xiàn)柱壓60KG,pmax設壓力上限110KG即可。(我公司紫外池子可耐150KG壓力加50KG保護可保證池子不會損壞)。
  d、手堵廢液鋼管出液端,眼看泵柱壓上升,且同時看檢測器顯示屏上AV值的變化。
  如果池內有氣泡,則手堵廢液管,AN值將劇烈變化,當手松開后AV值再次大步上升,證明池內有氣泡但沒有排掉,當手堵和松開廢液管時,AV值基本不變時,證明排汽泡成功,再觀察基線將穩(wěn)定。
  四、池內有氣泡,手堵廢液管,AV值劇烈變負的原因解釋,池內充滿空氣或液體時,光透過率
  

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