手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
PUREfrex®1.0于2011年推出，是基于PURE system開發的無細胞蛋白合成試劑盒，由轉錄、翻譯、能量再生所需的蛋白和核糖體組成。
圖2.PUREfrex®使用流程
PUREfrex®1.0使用方法（僅供參考）：
以20ul反應體系為例，如果需要擴大體積可以等比例增加對應試劑。
1. 在室溫或37℃下保溫1分鐘使溶液I完-全融解，然后在冰上冷卻。
2. 在冰上融化溶液II和溶液III。
3. 將溶液I，溶液II和溶液III 渦旋后簡短離心收集管底內容物。
4. 根據下列表格配置反應液，每1kb加入模板DNA 1-3ng/ul。
Water | 8-X μL |
Solution I | 10μL |
Solution II | 1μL |
Solution III | 1μL |
Template DNA | X μL |
總體積 | 20ul |
5. 在37°C的heat block或水浴中反應 2~4 h，合成蛋白。
6. 分析合成蛋白。通過SDS-PAGE驗證時，請用水稀釋反應液后進行電泳。
試劑盒組分：
組分名稱 | 組分內容 | 保存溫度 |
Solution I | Amino acids, NTPs, tRNAs and substrates for enzymes etc. | -20℃ |
Solution II | Proteins in 30 % glycerol buffer | -20℃/-80℃ |
Solution III | Ribosome (20 μM) | -80℃ |
DHFR DNA | PCR product containing a gene encoding dihydrofolate reductase (DHFR) from E.coli as a positive control. (20 ng/μL) | -20℃ |
請注意：1.在打開試劑盒之前請將試劑盒儲存在-80°C的溫度下。2.溶液II和溶液III避免反復凍融。
產品信息：
貨號 | 名稱 | 規格 |
GFK-PF001-0.25-EX |
PUREfrex®1.0 | 1 x 250 µl |
GFK-PF001-2ML-EX | 2 ml | |
GFK-PF001-10ML-EX | 5 x 2 ml |
除了以上目錄產品外，Cosmo Bio也能根據客戶的需求提供定制的PUREfrex®1.0。PUREfrex®1.0的成分信息是公開的，您可以根據PUREfrex®1.0設計定制試劑盒。
PUREfrex®1.0組分
PUREfrex®1.0 Solution I (Buffer, Salts, Substrates)組分 |
Hepes-KOH pH 7.6 |
Potassium glutamate |
Magnesium acetate |
Spermidine |
Dithiothreitol |
10-Formyl-tetrahydrofolate |
4 NTPs |
20 Amino acids |
Creatine phoshate |
tRNA mixture |
PUREfrex®1.0 Solution II (Proteins)組分 |
20 Aminoacyl-tRNA synthetases (ARS) |
Methionyl-tRNA transformylase (MTF) |
3 Initiation factors (IF1, IF2, IF3) |
3 Elongation factors (EF-Tu, EF-Ts, EF-G) |
3 Release factors (RF1, RF2, RF3) |
Ribosome recycling factor (RRF) |
T7 RNA polymerase |
Nucleoside diphosphate kinase (NDK) |
Adenylate kinase (ADK, myokinase) |
Ceatine kinase (CK) |
Pyrophosphatase (PPiase) |
PUREfrex®1.0 Solution III組分 |
Ribosome |
定制應用舉例
（-）RF1 | 用于通過如下圖所示的琥珀抑制合成含有非天然氨基酸的蛋白質。 |
（-）T7 RNA polymerase | 可用于檢測其他RNA聚合酶性能，如大腸桿菌RNA聚合酶。 |
（-）特異性氨基酸和（或）20種氨酰tRNA合成酶 | 用于合成含非天然氨基酸或少于20個氨基酸的蛋白質。 |
圖3.琥珀抑制途徑合成含有非天然氨基酸的蛋白質示意圖
當您的蛋白質需要分子伴侶的幫助或形成二硫鍵以形成正確的構象時，只需向PUREfrex®1.0中添加補充試劑即可。
分子伴侶-幫助蛋白正確折疊，合成可溶形式蛋白質
產品貨號 | 產品名稱 | 規格 |
GFK-PF003-0.5-EX | DnaK Mix | 500 µl Equivalents |
GFK-PF003-10ML-EX | DnaK Mix | 5 x 2 ml Equivalents |
GFK-PF004-0.5-EX | GroE Mix | 500 µl Equivalents |
GFK-PF004-10ML-EX | GroE Mix | 5 x 2 ml Equivalents |
幫助形成二硫鍵的添加物
產品貨號 | 產品名稱 | 規格 |
GFK-PF005-0.5-EX | DsbC Set | 500 µl Equivalents |
GFK-PF005-10ML-EX | DsbC Set | 5 x 2 ml Equivalents |
GFK-PF006-0.5-EX | PDI Set | 500 µl Equivalents |
GFK-PF006-10ML-EX | PDI Set | 5 x 2 ml Equivalents |
更多產品詳情請聯系Cosmo Bio中國授權代理-欣博盛生物
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。
采購中心