1.概述
藥物，或一切化學品對細胞的生理狀態是否能造成影響，能造成多大的影響，是生物學的基礎實驗之一。CCK-8與MTT等藥物毒性實驗就是一種測量方法。我們都知道“脫離劑量談毒性都是耍潑皮”，那么如何設置實驗中藥物的濃度呢？通常有兩種情形：

直接取一個固定的濃度，如40μM；

設置一組濃度梯度，如10μM、30μM、100μM。

這二者有什么不同？如何針對自己的實驗需求來選擇呢？我們將在下文介紹。

2 固定濃度的情形

一般來說，如果文獻直接甩出一個固定濃度進行實驗，沒有進行量效測試，說明這個藥物的效應是已知的，就像數學答案里的“易得”。

這個時候就應該查找這段method中是否給出了引用文獻。效應濃度已經在更早期的實驗中確定了，該文章作者本人研究所用的細胞樣本應該和早期文獻也能保持一致，所以他是在復現實驗，直接照做就可以了。

如果我們是在自己取值做實驗，通常這個濃度可能可以從以下角度推導得到：

基于藥物的藥理學研究，如藥代動力學參數：如果這是一個已知的藥物分子，我們不是第一次合成得到它，第一次提出以它作為藥物的文獻應該會提供其藥理學數據，如半衰期、分布容積等參數，可以基于研究實驗的目的計算決定；

基于臨床用藥的習慣劑量：如果這個藥物已經用于臨床了，可以參考臨床報告的劑量；

直接抄以前的文獻，拿來吧你：這就是第一段所說的情況，已經有人做實驗得到結論了，那我們可以直接使用同種細胞進行進一步的研究，反而保證了結論的可重復性。

3 濃度梯度的情形

如果一個文獻做了多個濃度或多個時間點來測試藥物效果，那最大的可能是該文獻所研究的細胞或藥物此前沒人做過，作者沒得引用，所以只能先做量效測評。

所以此時設計上就要考慮做梯度濃度+不同時間段的設計，從一系列實驗結果中找到濃度。

如何設計梯度和組別呢？如果有人做過類似的藥物或類似的細胞，我們可以引用前人的智慧，照搬之下再根據實驗目標作一定校正；如果沒參考對象，我們可以從以下角度：

設置濃度梯度，搞清楚IC50：先進行濃度梯度測試，用5-8個梯度去做預實驗，比如每個梯度差別一倍（10、20、40、80、160μM），總之要覆蓋藥物從低毒性到高毒性（甚至毒性過強導致細胞死亡）的濃度范圍，據此分組測細胞毒性和增殖，摸清楚這個藥物的IC50；（IC50計算可使用豆包或deepseek解決）

探索藥物有效劑量的范圍，發現劑量-效應之間的規律：基于IC50縮減劑量覆蓋的范圍，設置更細化的分組，嘗試畫出藥效隨劑量增加而上升達到峰值、然后隨劑量過量導致細胞死亡的曲線。

原則即：找出藥物產生效應的最佳濃度（閾值）以及不同濃度對細胞的影響趨勢。

安培生物致力成為推動生命科學進步值得信賴的合作者

深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術實力、先進的經營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業。總部設在廣東，服務面向全國。安培生物集進口試劑、實驗室耗材銷售、技術服務與合約開發為一體的專業化高科技公司，旨在為生命科學的發展提供較好的產品與服務。本公司建立了涵蓋分子生物學、細胞生物學、免疫學、信號傳導和神經科學等領域的產品供應線，在各個領域內向用戶提供較高的水平和質量穩定的產品，安培生物致力于為廣大的科研機構、高等院校等客戶提供各種產品、技術支持與服務。可以在第一時間為用戶提供比較先進的專業資訊和完備的產品和物流服務。 專業的技術力量使得我們能夠為廣大用戶提供強大的技術支持，深厚的人脈資源使得我們在全國主要城市擁有眾多的合作伙伴，安培生物非常榮幸能將世界上先進的高科技產品推薦給國內從事生物學領域科研的老師和同仁。作為專業性的產品供應商，公司出資存備了大量現貨，配合優秀的銷售隊伍以及專業的技術支持，隨時為客戶提供服務