1. 熒光信號異常(過高或過低)
原因:
檢測管未完全避光,導致熒光淬滅或背景信號干擾。
樣本或試劑中存在雜質(如蛋白質、鹽類),影響熒光結合效率。
檢測管材質不匹配(如非官方推薦品牌),熒光透過率低。
解決方案:
確保檢測管存儲于避光環境,操作時避免強光直射。
離心樣本去除雜質,或使用高純度試劑。
優先選擇官方認證的Qubit檢測管(如Thermo Fisher Scientific或翌圣生物產品)。
2. 背景值過高
原因:
檢測管未清潔干凈,殘留熒光物質。
試劑或樣本污染(如重復使用檢測管)。
儀器未校準或存在光學污染。
解決方案:
使用前用70%乙醇擦拭檢測管,避免重復使用。
定期校準Qubit儀器,清理檢測槽。
若背景值持續異常,聯系技術支持排查儀器故障。
3. 檢測結果重復性差
原因:
檢測管加樣體積不準確(如移液器誤差)。
樣本或試劑未充分混勻,導致濃度梯度。
檢測管壁吸附樣本,影響實際檢測量。
解決方案:
使用校準后的移液器,確保加樣體積一致。
樣本與試劑混合后渦旋震蕩3-5秒,靜置后離心去除氣泡。
選擇低吸附性的檢測管(如翌圣生物Qubit專用檢測管,CV值<10%)。
4. 檢測管破裂或漏液
原因:
操作不當(如過度擠壓或跌落)。
檢測管質量缺陷(如管壁過薄)。
低溫環境下檢測管變脆。
解決方案:
輕拿輕放檢測管,避免劇烈震蕩。
選擇質量可靠的檢測管品牌,檢查包裝是否完好。
若需低溫保存,提前將檢測管恢復至室溫再使用。
5. 檢測管與儀器不兼容
原因:
使用了非官方推薦的檢測管型號。
檢測管尺寸或材質不符合儀器要求(如厚度、透光率)。
解決方案:
參考Qubit儀器說明書,選擇適配的檢測管(如0.2 mL或0.5 mL規格)。
避免使用非透明或高自發熒光的檢測管。
若需批量檢測,優先選擇兼容酶標儀的檢測管(如翌圣生物離心管開蓋器搭配使用)。
6. 檢測管內樣本凝固或結晶
原因:
樣本保存溫度不當(如DMSO試劑需室溫保存)。
檢測管內樣本長時間暴露于低溫環境。
解決方案:
嚴格按照試劑說明書保存樣本和試劑。
檢測前將樣本恢復至室溫,避免反復凍融。
總結建議
定期校準:確保Qubit儀器和檢測管處于最佳狀態。
優化操作:遵循標準流程,減少人為誤差。
選擇優質耗材:使用官方認證或高兼容性的檢測管(如翌圣生物Qubit專用檢測管,R²>0.99)。
通過以上措施,可顯著提高Qubit檢測的準確性和重復性。
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