前言

抗體偶聯藥物（ADC）憑借精準殺傷力成為抗癌新星。ADC不僅配備識別腫瘤細胞的“導航系統”——抗體，更是搭載高效抗癌的有效載荷（Payload）。

Payload是ADC在細胞內發揮毒性作用的關鍵，決定ADC的效力和適應癥范圍。新型拓撲異構酶抑制劑，如Exatecan衍生物Dxd、SN-38等。

癌細胞的精準“狙-擊手”

理想的Payload應具有足夠強的細胞毒性、較低的免疫原性、較高的穩定性、有旁觀者效應等特性。

Payload歷經三代技術迭代，第-一代使用細胞毒性載荷，如甲氨蝶呤、長春花堿、阿霉素，第二代以微管蛋白抑制劑為主，第三代主要為DNA損傷劑。

如今最耀眼的Payload當屬拓撲異構酶抑制劑。這類物質通過特異性阻斷癌細胞DNA復制，實現高效殺滅腫瘤細胞的同時降低副作用。

研究發現，依喜替康（Exatecan）衍生物Dxd的體外抗腫瘤活性達到SN-38的10倍，而SN-38本身已是伊立替康（Irinotecan，一種喜樹堿衍生物）的100-1000倍。這種指數級的效能提升，使得基于拓撲異構酶抑制劑的ADC藥物在臨床試驗中表現亮眼。

基于Dxd和SN-38的ADC研究（源自文獻：doi: 10.1186/s13045-022-01397-y）

截止到2025年4月10日，已有4款基于拓撲異構酶Ⅰ抑制劑的ADC藥物獲批上市。

三款獲得美國FDA批準，分別為第-一三共和阿斯利康聯合開發兩款以Dxd為有效載荷的Trastuzumab deruxtecan（Enhertu®）和Datopotamab deruxtecan（Datroway®），分別靶向HER2和TROP2，以及吉利德開發的以SN-38為有效載荷的靶向TROP2的Sacituzumab govitecan（Trodelvy®）。

另一款獲得我國NMPA批準，即科倫博泰開發的靶向TROP2的蘆康沙妥珠單抗（佳泰萊®），有效載荷為一種新型的Belotecan衍生的拓撲異構酶Ⅰ抑制劑。

抗Dxd抗體：助力ADC開發

ADC藥物開發需要確定其穩定性、藥物釋放速率、藥效和毒性等，尤其是腫瘤細胞內有效載荷的分子濃度。

義翹神州成功開發一系列抗Dxd抗體，包括兔單抗、鼠單抗以及生物素標記抗體，適用于ADC臨床前和臨床階段的DAR和PK分析，具有高純度、高特異性、高親和力特性。

產品驗證數據

Anti-Dxd/Exatecan 鼠單抗， Cat: 68256-MM01

ADC結合試驗 & 競爭結合試驗

Immobilized Anti-Dxd/Exatecan Antibody at 1 μg/mL (100 μL/well), add gradient-diluted Dxd-ADC and Recombiant Human ErbB2 Protein (Cat# 10004-H08H), then add the HRP conjugated anti-His antibody (Cat# 105327-MM02T-H), the EC50 is 0.5-15 ng/mL. The naked antibody (without Dxd) is the negative control.

Immobilized Dxd-ADC at 1 μg/mL (100 μL/well), add Anti-Dxd/Exatecan Antibody (Cat#: 68256-MM01) 1 μg/mL (50 μL/well), gradient-diluted free Dxd or Exatecan from 0.4 μg/ml (50 μL/well) blocked the binding of Anti-Dxd/Exatecan Antibody to Dxd-ADC.

交叉反應試驗

Immobilized Dxd-ADC, Naked Antibody, Exatecan ADC, Naked Antibody, Dxd-OVA, MMAE-OVA, MMAF-OVA, DM1-OVA, SN38-OVA, OVA, at 1 μg/mL (100 μL/well), then add the Anti-Dxd Antibody (Cat#: 68256-MM01) to detect the cross-reactivity.

抗Payload抗體應用場景有哪些？

1 ADC藥代動力學分析

ADC異質性較高，必須評估多種待測物才能確定其藥代動力學（PK）特征。常用于表征ADC藥物PK特征的待測物包括總抗體、偶聯抗體、抗體偶聯藥物、未偶聯藥物等。

利用基于配體結合分析（LBA）和液相色譜-串聯質譜檢測（LC-MS/MS）的方法來檢測各種ADC分析物。LBA常用于檢測ADC藥物中的總抗體（DAR≥0）和偶聯抗體（DAR≥1），LC-MS/MS常用于檢測ADC藥物中各種形式的有效載荷。

在ADC的PK分析中，抗Payload抗體可用于監測偶聯抗體的濃度變化、分布情況及清除速率等。酶聯免疫吸附試驗（ELISA）是LBA檢測樣本中不同分析物的金標準。抗Payload抗體可用于檢測偶聯抗體，即至少偶聯一個藥物的抗體（DAR≥1）。

2 DAR值定量分析

DAR值不僅決定Payload的載量，還會影響ADC在體內的分布和清除速率等PK特征，并影響ADC的安全性和有效性。一般認為，當DAR值為2-4時，ADC藥物能展現出治療效果。而當DAR值過高時，則會引發較高的細胞毒性。在ADC的開發過程中，準確測定和監測DAR值的分布是至關重要的。

DAR的分析主要涉及兩個方面：一是平均DAR值，即測定體系中總的藥物分子和抗體分子的摩爾濃度之比；二是DAR的分布，即具有不同DAR的ADC分子分別占總的ADC分子的比例。抗Payload抗體可用于定量分析ADC藥物中的抗體偶聯藥物，即所有偶聯在抗體上的藥物小分子。

義翹神州Anti-Payload抗體產品

義翹神州成功開發一系列抗Payload抗體，包括抗Dxd/Exatecan、MMAE、MMAF等單克隆抗體，具有高純度、高特異性、高親和力的優勢，用于檢測ADC藥物的血漿/血清動力學特征、DAR值和載藥量分布，評估ADC藥物的穩定性、安全性和有效性，加速ADC藥物的研發進程。

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【參考文獻】

1. Louise Conilh, et al. Payload diversifcation: a key step in the development of antibody-drug conjugates. Journal of Hematology & Oncology, 2023. doi.org/10.1186/s13045-022-01397-y2. Han, S. et al. The Potentialof Topoisomerase Inhibitor-BasedAntibody–Drug Conjugates.Pharmaceutics, 2022.doi.org/10.3390/pharmaceutics14081707