尺寸排阻色譜柱是一種基于分子尺寸差異進行分離的高效色譜柱。基于多孔性凝膠作為固定相,利用分子在凝膠孔道中的排阻效應進行分離。在色譜柱中,大分子不能滲透到凝膠孔穴中去而被排阻,較早地流出色譜柱;中等體積的分子部分滲透;小分子則能夠完q滲透入凝膠孔道內,最后流出色譜柱。因此,樣品分子基本按其分子大小先后流出,從而達到分離的目的。
尺寸排阻色譜柱的安裝過程:
1、連接柱前管道
將色譜柱的入口端與液相色譜儀的泵出口管道牢固連接。一般采用不銹鋼管或聚醚醚酮(PEEK)管進行連接,連接時要確保管道插入色譜柱入口端足夠的深度,并且使用合適的扳手擰緊接頭,防止在實驗過程中發生泄漏。
注意避免過度用力擰緊接頭,以免損壞色譜柱入口端的連接部件。可以在接頭處適當涂抹一些密封脂,增強密封效果。
2、安裝柱頭過濾器
在色譜柱入口處安裝柱頭過濾器,柱頭過濾器的作用是防止樣品中的顆粒雜質進入色譜柱,造成堵塞。將柱頭過濾器放置在色譜柱入口端,然后通過適當的方式(如螺紋連接或卡套連接)將其固定在色譜柱上。
確保柱頭過濾器的安裝方向正確,并且與色譜柱入口緊密貼合,防止出現死體積過大的情況。
3、連接柱后管道
把色譜柱的出口端與檢測器的流通池入口連接起來。同樣要使用合適的管道,并保證連接牢固且無泄漏。連接完成后,將柱尾螺母擰緊在色譜柱出口端,以確保密封良好。
在這個過程中,要注意不要讓任何雜質進入色譜柱內部,因為即使是微小的雜質也可能影響色譜柱的分離性能。
4、調整色譜柱位置
根據液相色譜儀的結構和使用要求,將安裝好色譜柱的流路部分放置在合適的位置。如果是有溫控要求的色譜柱,還需要將其安裝在溫度控制器相應的位置,確保色譜柱能夠在設定的溫度下工作。
調整色譜柱的位置時,要避免對色譜柱造成碰撞或施加過大的外力,防止色譜柱內部的填料結構受到破壞。
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