凝集素是一類能與糖結合的蛋白質或糖蛋白。部分凝集素在攝入較多時可能會對人體產生不良影響。測定食用菌中的凝集素含量能夠評估其食用安全性,避免因食用含有過量凝集素的食用菌而危害健康。
根據GB/T 44734-2024,測定食用菌中凝集素的測定方法是高效液相色譜法,原理是:試樣中凝集素經磷酸鹽緩沖液提取,利用溶解度、分子質量差異,通過硫酸銨沉淀、超濾濃縮后,高效液相色譜法測定,以保留時間定性,外標法定量。
實驗涉及標準曲線的繪制:
食用菌中凝集素標準溶液溶液:準確稱取10mg食用菌中凝集素,于試管中用水溶解,并轉移至10mL容量瓶中定容至刻度線。該標準溶液中食用菌中凝集素的質量濃度為1mg/mL,-20℃冰箱避光保存,有效期一周。
用5mL規格的Miragen電子移液器,設置5個體積為100、200、300、500、1000μL(程序可存儲和調用),將5個體積的食用菌中凝集素標準溶液溶液分別加入至5mL容量瓶中;將以上5個容量瓶中的食用菌中凝集素標準溶液用水稀釋、定容至刻度線,搖勻,得到食用菌中凝集素系列標準工作溶液,質量濃度分別為20、40、60、100、200μg/mL,按參考色譜條件測定,食用菌中凝集素典型高效液相色譜圖見下圖,以食用菌中凝集素質量濃度為橫坐標、相應的峰面積為縱坐標,繪制標準曲線或計算線性回歸方程。
實驗室移取小體積(幾微升到10毫升)的液體,一般采用移液器。Miragen電動移液器,數值靠設定或選定,電機控制活塞運動,吸液和排液也更加穩定,還有步驟少、調數快、模式多等諸多優勢。
Miragen電動移液器還可給電機多段信號,從而達到吸液和排液分次數且各段體積可調,可實現單吸多排、多吸單排等效果,程序還可存儲和調用,更加可靠、便捷。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。