產品簡介:
紅細胞(Red blood cell,RBC)也稱紅血球,是血液中數量最多的一種血細胞,脊椎動物體內通過RBC運送氧氣,RBC同時還具有免疫功能。在貧血檢查中可通過蔗糖水溶血試驗來檢測紅細胞膜的缺陷,尤其適用于檢測陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥(paroxysmalnocturnal hemoglobinuria,PNH),該癥為獲得性紅細胞膜缺陷引起的慢性血管內溶血,常在睡眠時加重,可伴發性血紅蛋白尿和全血細胞減少。
酸溶血定性檢測試劑盒是利用PNH紅細胞對補體敏感性增高,在酸化的血清中經過37℃孵育,易溶血,血清經過56℃加熱30min,使補體滅活,病人紅細胞不溶解,該試劑盒主要用于檢測人、動物血液的紅細胞膜的缺陷,尤其用于鑒定陣發性睡眠性血紅蛋白尿癥。該試劑盒僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
自備材料:
1、生理鹽水
2、與患者同血型的正常新鮮血液
3、水浴鍋
操作步驟(僅供參考):
1、制備脫纖維血清:取患者和與患者同血型的正常人靜脈血 5ml,慢慢注入含有3個潔凈玻璃珠的小容器中,立即輕輕的持續搖動,直至纖維蛋白出現并附著于玻璃珠上為止(一 般需要 10~15min)。轉移脫纖維血至潔凈離心管,低速離心,取上清待用,即為脫纖維血清。
2、制備50%紅細胞懸液:取脫纖維血清,經生理鹽水洗滌3次,每次都應顛倒、混勻、離心,盡量吸棄上清液,留下紅細胞沉淀,加入等體積 PNH NaCl Buffer 重新懸浮紅細
胞,即為50%紅細胞懸液。
3、取試管6支,按下表先加入同血型正常人新鮮血清0.5ml,其中 3、6兩支試管在 56℃
水浴30min,使補體滅活,其余4管置于室溫 30min。此后按下表順序操作。
加入物(ml) | 待測管 | 對照管 | ||||
試管號 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
正常人新鮮血清 | 0.5 | 0.5 | — | 0.5 | 0.5 | — |
正常人 56℃滅活血清 | — | — | 0.5 | — | — | 0.5 |
Acidic Buffer | — | 0.05 | 0.05 | — | 0.05 | 0.05 |
50%患者紅細胞懸液 | 0.05 | 0.05 | 0.05 | — | — | — |
50%正常人紅細胞懸液 | — | — | — | 0.05 | 0.05 | 0.05 |
混勻,置于 37℃水浴中 1h(30min 時輕輕混勻一次),離心。 | ||||||
陽性結果(溶血) | ± | 3+ | — | — | — | — |
注意:如果PNH 患者第3管(加正常人滅活血清管)溶血,則說明此溶血不依賴于補體,故不是PNH,可能是紅細胞有其他缺陷(如球形紅細胞增多癥),應做進一步鑒別。
參考區間:正常人無溶血。
注意事項:
1、 所用器具必須潔凈干燥,以免溶血造成假陰性。
2、 血清酸化后應注意密閉保存,盡快檢測,避免CO2逸出導致血清酸度降低,影響溶血程度。
3、 如果患者多次輸血,其血液中的不正常細胞會相應減少,可呈弱陽性或陰性。出現這種情況應延長孵育時間至 4~6h,再觀察溶血情況。
4、 該實驗可作為PNH的過篩實驗,陰性可排除 PNH,陽性應做酸化溶血實驗證實。
有效期:6個月有效。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。