氧化應激被定義為由于抗氧化劑和氧化劑之間的失衡，導致活性氧（ROS）產生增加。高級氧化蛋白產物（AOPP）是在氧化應激期間通過氯化氧化劑（如氯胺和次氯酸）與血漿蛋白的反應而產生的尿毒癥毒素。AOPP在結構上與晚期糖基化終末產物（AGE）蛋白相似，并表現出類似的生物活性。AOPP在患有腎臟并發癥、動脈粥樣硬化、糖尿病、系統性硬化癥以及HIV陽性的患者中水平升高。用次氯酸（HOCl）處理的人血清白蛋白（HSA）和體內產生的AOPP可以分別在中性粒細胞和單核細胞中引發氧化反應，這表明兩者都可以作為炎癥的真實介質。盡管AOPP的降解和從血液中清除的機制尚未w全闡明，但似乎肝臟和脾臟主要負責它們的分離和清除。

AOPP檢測為許多與尿毒癥相關疾病狀態中的自由基活性以及許多化合物的抗氧化特性測量提供了相關信息。研究人員已經修改了這種快速且簡單的協議，用于評估血漿和組織樣本。AOPP-HSA濃度是通過氯胺當量標準確定的。

艾美捷OxiSelect AOPP檢測試劑盒（#STA-318）提供了一種簡單、可重復且一致的系統，用于檢測血漿、裂解液和組織勻漿中的高級氧化蛋白產物。該試劑盒包括一個氯胺標準品和一個AOPP人血清白蛋白（HSA）綴合物，用作陽性對照。每個試劑盒提供足夠的試劑，可進行200次檢測，包括標準曲線和未知樣本。

檢測原理：

高級氧化蛋白產物（AOPP）檢測試劑盒是一種生物檢測工具，用于直接定量測量生物樣本中的AOPP。未知的含AOPP樣本或氯胺標準品首先與檢測反應啟動劑混合，開始顏色發育過程。經過短暫孵育后，加入終止液，樣本和標準品可以通過標準比色平板讀數器讀取。通過與預先確定的氯胺標準曲線比較，確定未知樣本中的AOPP含量。

OxiSelect AOPP檢測試劑盒組分：

盒子1（室溫運輸）

1. 氯胺標準品（部件編號231801）：1支20 µL試管，100 mM氯胺。

2. 氯胺反應啟動劑（部件編號231802）：1瓶1.0 g粉末。

3. 終止液（部件編號231803）：1瓶5 mL。

4. 10X檢測稀釋液（部件編號231804）：1瓶20 mL。w

盒子2（藍色冰袋運輸）

1. AOPP-HSA陽性對照（部件編號231805）：1支100 µL試管，7.5 mg/mL AOPP-人血清白蛋白，蛋白質中AOPP含量為0.14 µmol/mg。

未提供材料：

1. 蛋白質樣本，如純化蛋白、血漿、血清、細胞裂解液

2. 96孔微量滴定板

3. 1X PBS

儲存：

收到后，將AOPP-HSA陽性對照儲存于-20oC。將所有其他組分儲存于4oC。

結果示例：

以下圖表展示了氯胺標準曲線和AOPP-HSA陽性對照的典型AOPP檢測結果。以下數據僅供參考，不應用于解釋實際結果。

圖1. AOPP檢測的氯胺標準曲線。氯胺標準曲線是按照檢測協議描述創建的。

圖2. AOPP-HSA陽性對照和未處理的HSA均以100 µM濃度制備，并按照檢測協議用STA-318進行檢測。

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OxiSelect AOPP檢測試劑盒引用文獻：

1. Deschamps-Latscha B. et al. (2005) Am. J. Kidney Dis. 45(1): 39-47.

2. Servettaz, A. et al. (2007) Ann. Rheum. Dis. 66: 1202-1209.

3. Witko-Sarsat, V. et al. (1996) Kidney International 49: 1304-1313.