超聲細胞破碎儀的破碎率受多種因素影響,在優化條件下,其破碎率可達90%以上,但在實際應用中一般根據具體需求選擇合適的參數和條件,以達到理想的破碎效果,以下是具體介紹:
1、影響破碎率的因素
超聲功率:功率越大,產生的空化效應和機械剪切力越強,越有利于細胞破碎。但功率過高可能會導致樣品溫度過高,使生物大分子變性失活,還可能對儀器造成損壞。
超聲時間:適當延長超聲時間通常能提高破碎率,但過長的時間可能使已破碎的細胞碎片進一步細化,增加后續分離純化的難度,也會使樣品溫度過度升高。
樣品濃度:細胞濃度過高,會使超聲能量分散,影響破碎效果;濃度過低,則會浪費儀器資源和時間。一般來說,需要根據細胞類型和儀器性能選擇合適的樣品濃度。
細胞類型:不同類型的細胞結構和細胞壁組成不同,對超聲的耐受程度也不同。例如,細菌的細胞壁較厚,需要較高的超聲功率和較長的時間才能破碎;而動物細胞相對脆弱,更容易被超聲破碎。
2、典型的破碎率范圍
在實驗室中,對于一些常見的細胞,如大腸桿菌等原核細胞,在優化的超聲條件下,破碎率可以達到90%以上。對于動物細胞,如HeLa細胞等,破碎率也能達到較高水平,通常在80%-95%左右。對于植物細胞,由于其有細胞壁的保護,破碎難度較大,超聲細胞破碎儀的破碎率一般在60%-80%左右。
實際操作中,應通過預實驗優化超聲參數,在保證細胞破碎率的同時,盡量減少對目標產物的影響。此外,還可以結合其他細胞破碎方法,如酶解法、化學法等,以提高破碎效果和破碎率。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。