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凝膠色譜凈化系統(tǒng)，特別是凝膠滲透色譜(GPC)系統(tǒng)，在現(xiàn)代分析化學(xué)、生物化學(xué)及環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域中扮演著至關(guān)重要的角色，利用多孔凝膠作為固定相，根據(jù)分子大小的差異對(duì)樣品進(jìn)行分離。大分子物質(zhì)由于無(wú)法進(jìn)入凝膠孔隙而先流出，小分子物質(zhì)則進(jìn)入孔隙并后流出，從而實(shí)現(xiàn)不同大小分子的有效分離。這種分離機(jī)制對(duì)于去除樣品中的大分子雜質(zhì)，如蛋白質(zhì)、多糖等，以及富集目標(biāo)小分子化合物，如藥物活性成分、環(huán)境污染物等，具有重要意義。
凝膠色譜凈化系統(tǒng)的測(cè)定步驟：
1.樣品準(zhǔn)備：將待測(cè)樣品溶解在適量的溶劑中，使其濃度達(dá)到適合測(cè)定的范圍。溶液中的固體顆粒應(yīng)盡量去除，可通過(guò)過(guò)濾或離心操作來(lái)完成。
2.儀器檢查：打開(kāi)儀器電源，啟動(dòng)GPC系統(tǒng)。檢查儀器各個(gè)部分的連接是否緊密，確保沒(méi)有泄漏。檢查流動(dòng)相的質(zhì)量和純度，必要時(shí)進(jìn)行更換。
3.設(shè)置參數(shù)：根據(jù)樣品的特性和需要選擇合適的洗脫緩沖液，并將其冷藏備用。設(shè)置流動(dòng)相的流速和溫度，一般情況下，流速根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇，溫度一般設(shè)置在室溫下進(jìn)行。
4.樣品注入：使用適當(dāng)?shù)拿?xì)管或注射器將樣品注入到色譜柱中。
5.開(kāi)始運(yùn)行：開(kāi)始運(yùn)行GPC實(shí)驗(yàn)，記錄運(yùn)行開(kāi)始的時(shí)間。設(shè)定好GPC柱的溫度、流速和檢測(cè)器的靈敏度等參數(shù)。打開(kāi)檢測(cè)器的電源，選擇合適的檢測(cè)波長(zhǎng)或檢測(cè)器類(lèi)型。
6.數(shù)據(jù)記錄：開(kāi)始樣品分離，記錄分離過(guò)程中的響應(yīng)信號(hào)，并保存數(shù)據(jù)。
7.數(shù)據(jù)處理：使用專(zhuān)用的GPC數(shù)據(jù)處理軟件對(duì)得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。根據(jù)響應(yīng)信號(hào)與時(shí)間的關(guān)系曲線(xiàn)，計(jì)算出不同分子量的聚合物峰面積。將樣品的峰面積與標(biāo)準(zhǔn)聚合物的峰面積進(jìn)行比較，計(jì)算出待測(cè)樣品的分子量分布。
8.結(jié)果輸出：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，可以生成相關(guān)的分子量分布曲線(xiàn)或分子量平均值等結(jié)果。
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