Polysciences PEI 轉染試劑:科研與工業應用的全面解析與使用指南
在基因功能研究、蛋白質表達和細胞治療等領域,高效的基因轉染技術是實驗成功的關鍵。Polysciences PEI 轉染試劑憑借其卓i越的性能和廣泛的適用性,成為全球科研工作者和生物技術企業的首i選工具。本文將深入解析其核心優勢、使用技巧及典型應用場景,助您快速掌握這一高效轉染方案。
一、Polysciences PEI 轉染試劑的核心優勢
1. 高效性與廣譜適用性
PEI(聚乙烯亞胺)作為陽離子聚合物,通過靜電作用與DNA結合形成穩定復合物,高效穿透細胞膜,尤其適用于難轉染的細胞系(如原代細胞、懸浮細胞)。其轉染效率在HEK293、CHO、昆蟲細胞等常見模型中表現優異,甚至超越脂質體試劑。
2. 低細胞毒性,高兼容性
與部分傳統轉染試劑相比,Polysciences PEI 經過優化配方處理,顯著降低細胞毒性,確保轉染后細胞活性維持在較高水平,適用于長期基因表達實驗。
3. 成本效益顯著
PEI試劑價格遠低于脂質體或病毒載體,且用量少,適合大規模生產(如重組蛋白、抗體藥物開發),大幅降低實驗室或工業級實驗成本。
4. 操作簡便,穩定性強
無需復雜步驟或特殊設備,試劑與DNA混合后即可使用,且可在4°C長期保存,避免反復凍融對效果的影響。
二、Polysciences PEI 轉染試劑使用步驟詳解
實驗準備
- 細胞狀態:確保細胞處于對數生長期,融合度達70%-80%。
- 試劑比例:DNA與PEI的比例需優化(常用范圍1:2至1:4),不同細胞系需預實驗確定最佳配比。
操作流程
1. 復合物制備:將稀釋后的PEI與DNA在無血清培養基中混合,靜置15-30分鐘。
2. 轉染處理:將復合物逐滴加入細胞培養基,輕柔混勻后繼續培養。
3. 結果檢測:通常在24-72小時后通過熒光顯微鏡(GFP標記)、Western Blot或qPCR評估轉染效率。
優化建議
- 對于敏感細胞,可在轉染4-6小時后更換新鮮培養基以減少毒性。
- 使用血清培養基時,需確保復合物形成階段使用無血清環境以避免干擾。
三、典型應用場景與成功案例
1. 重組蛋白生產
在CHO細胞中,Polysciences PEI 成功實現高表達量單克隆抗體的穩定生產,被多家生物制藥企業用于臨床級蛋白制備。
2. 基因編輯(CRISPR/Cas9)
通過PEI遞送Cas9質粒與sgRNA,在神經干細胞中實現高效基因敲除,助力神經退行性疾病機制研究。
3. 病毒載體包裝
與慢病毒或腺病毒包裝系統聯用,顯著提高病毒滴度,廣泛應用于基因治療研究。
四、常見問題解答(FAQ)
Q1:轉染后細胞死亡較多,如何解決?
- 降低PEI/DNA比例或復合物孵育時間。
- 轉染后4-6小時更換培養基,減少試劑暴露時間。
Q2:懸浮細胞轉染效率低怎么辦?
- 優化離心轉染法(如使用Pluronic F-68增強復合物接觸)。
- 調整細胞密度至1×10^6 cells/mL,并增加DNA用量。
Q3:能否用于體內轉染?
- PEI適用于局部注射(如腫瘤模型),但需注意劑量控制以避免免疫反應。推薦使用體內專用修飾型PEI試劑。
五、與其他轉染試劑的對比
特性 | Polysciences PEI | 脂質體試劑 | 病毒載體 |
轉染效率 | 高(廣譜) | 中高(依賴細胞) | 極i高 |
細胞毒性 | 低 | 中高 | 低(但存在生物風險) |
成本 | 低 | 高 | 極i高 |
實驗周期 | 短(24-48小時) | 短 | 長(需包裝病毒) |
適用場景 | 常規研究、大規模生產 | 貼壁細胞 | 難轉染細胞、體內 |
六、購買與技術支持
Polysciences PEI 轉染試劑可通過授權經銷商(如柏萊源(天津)生物科技有限公司)或直接采購。推薦選擇線性PEI(分子量25 kDa)(貨號:23966)或支鏈PEI(貨號:24765),根據實驗需求選擇。技術支持團隊提供詳細Protocol及細胞特異性優化方案,可通過獲取最新應用文獻。
七、結語
無論是基礎研究還是工業級生物生產,Polysciences PEI 轉染試劑以其高效、經濟、易用的特點,成為基因遞送領域的黃金標準。通過合理優化實驗條件,您可輕松實現從質粒DNA到功能性蛋白的高效轉化,加速科研突破與產業化進程。立即聯系柏萊源生物,獲取免費試用裝或技術手冊,開啟您的高效轉染之旅!
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