制備型液相色譜儀和制備型氣相色譜儀有以下區別:
一、分析對象
1.制備型液相色譜儀:適用于溶解后能制成溶液的樣品,尤其對高沸點、揮發性差、熱穩定性差、分子量大的有機物以及離子型化合物和高聚物等有很好的分離效果,如蛋白質、核酸、多糖等生物大分子,以及一些不易揮發的藥物中間體、天然產物等。
2.制備型氣相色譜儀:主要用于能氣化、熱穩定性好且沸點較低的樣品分析,如烴類、醇類、酯類等小分子有機化合物,對于沸點太高或熱穩定性差的物質難以分析,如一些高分子聚合物、熱不穩定的生物活性物質等就不適合用氣相色譜分析。
二、流動相
1.制備型液相色譜儀:流動相為液體,如甲醇、乙腈、水等有機溶劑或它們的混合溶液,以及各種緩沖溶液等。流動相與樣品組分之間存在相互作用力,如氫鍵、范德華力、靜電作用力等,通過選擇不同的流動相及其配比,可以調節樣品組分在固定相和流動相之間的分配系數,從而提高分離效果。
2.制備型氣相色譜儀:流動相是惰性氣體,如氦氣、氮氣、氫氣等。氣體流動相與樣品組分之間基本沒有相互作用力,主要是攜帶樣品通過色譜柱,樣品組分在固定相和流動相之間的分配主要取決于其在固定相上的吸附或溶解能力。
三、操作條件
1.制備型液相色譜儀:通常在室溫下操作,特殊情況可能需要控制溫度,但一般不需要高溫。由于液體流動相的粘度較大,為了使流動相能夠順利通過色譜柱,需要采用高壓輸液泵來提供壓力,一般工作壓力在幾兆帕到幾十兆帕之間。
2.制備型氣相色譜儀:需要對色譜柱、進樣器和檢測器等進行加溫操作,以保證樣品能夠氣化并在色譜柱中有效分離,柱溫通常在幾十攝氏度到幾百攝氏度之間。操作壓力相對較低,一般在幾大氣壓到幾十氣壓范圍內。
四、儀器構造
1.制備型液相色譜儀:一般由高壓輸液泵、進樣系統、色譜柱、檢測器和數據處理系統等組成。進樣系統常采用隔膜注射進樣器或高壓進樣閥,可實現定量進樣。色譜柱通常較短,內徑較大,以適應制備需求。
2.制備型氣相色譜儀:由載氣源、進樣部分、色譜柱、柱溫箱、檢測器和數據處理系統組成。進樣部分有多種進樣器可供選擇,如填充柱進樣器、毛細管分流/不分流進樣器等。色譜柱一般較長,內徑較小。
五、檢測方法
1.制備型液相色譜儀:常用的檢測器有紫外-可見檢測器、熒光檢測器、蒸發光散射檢測器、示差折光檢測器等。紫外-可見檢測器適用于對紫外光或可見光有吸收的物質;熒光檢測器用于具有熒光特性的物質檢測,靈敏度高;蒸發光散射檢測器可檢測無發色基團的物質。
2.制備型氣相色譜儀:常見的檢測器有氫火焰離子化檢測器(FID)、熱導檢測器(TCD)、電子捕獲檢測器(ECD)、氮磷檢測器(NPD)、火焰光度檢測器(FPD)等。氫火焰離子化檢測器對大多數有機物有很高的靈敏度;熱導檢測器通用性強,可檢測多種氣體;電子捕獲檢測器對含電負性基團的物質有高選擇性和高靈敏度。
六、應用范圍
1.制備型液相色譜儀:在生物制藥、天然產物提取、藥物研發、食品分析、環境監測等領域應用廣泛,可用于分離和制備各種生物活性物質、藥物中間體、食品添加劑、環境污染物等。
2.制備型氣相色譜儀:主要應用于石油化工、精細化工、環境監測、食品飲料等行業,用于分析和制備揮發性有機化合物、氣體樣品等,如石油裂解產物分析、空氣中揮發性有機物檢測、酒類香氣成分分析等。
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