CHO細胞全解析|生物制藥的核心載體
一、CHO細胞概要
?CHO細胞(Chinese hamster ovary cell)?是一種從中國倉鼠卵巢細胞中分離出來的細胞系,具有無限分裂的能力,常用于生物制藥中的重組蛋白生產(chǎn)。CHO細胞具有多種優(yōu)點,如快速生長、易于培養(yǎng)、高產(chǎn)量等,因此被廣泛應用于生物技術領域,特別是在蛋白質(zhì)表達和純化方面表現(xiàn)出色?
全稱:Chinese Hamster Ovary(中國倉鼠卵巢細胞)
建系時間:1957年由Theodore Puck團隊建立
二、CHO細胞關鍵特性
蛋白翻譯后修飾能力(糖基化模式近人源)
懸浮培養(yǎng)適應性(可達20×10? cells/mL密度)
基因組穩(wěn)定性(平均染色體數(shù)21條)
三、CHO細胞技術演進史
注:當前量產(chǎn)抗體表達量>5g/L
四、CHO細胞核心應用領域
應用場景 | 代表產(chǎn)物 | 全球份額 |
單克隆抗體 | 阿達木單抗(修美樂) | 62% |
融合蛋白 | Etanercept(恩利) | 18% |
酶替代治療 | 阿葡萄糖苷酶α | 9% |
病毒疫苗 | 流感病毒樣顆粒疫苗 | 新增長領域 |
五、CHO 細胞產(chǎn)業(yè)化優(yōu)勢與局限
? 核心優(yōu)勢
人源化N-糖基化(降低免疫原性)
耐受長時間連續(xù)灌流培養(yǎng)(90天+)
可構(gòu)建穩(wěn)定表達克隆(>100代穩(wěn)定性)
?? 技術瓶頸
培養(yǎng)成本昂貴(無血清培養(yǎng)基$200/L)
潛在病毒污染風險(需三重除病毒過濾)
蛋白過度甘露糖化問題(影響半衰期)
六、CHO細胞關鍵操作規(guī)范
1. 培養(yǎng)條件
溫度:37℃(對數(shù)期)→32℃(生產(chǎn)期)
pH控制:6.8-7.2(碳酸鹽緩沖系統(tǒng))
2. 轉(zhuǎn)染試劑選擇
聚乙烯亞胺(PEI)轉(zhuǎn)染效率>75%
電穿孔法適用于難轉(zhuǎn)染克隆
3. 篩選系統(tǒng)
DHFR/MTX系統(tǒng)(甲氨蝶呤加壓篩選)
GS/MSX系統(tǒng)(蛋氨酸硫代類似物)
七、購買渠道
【ATCC代理——天津益元利康生物科技有限公司】
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