生成夾心狀的抗體一抗原一抗體復合物，糖類抗原CA 50CA 125就用的其中的第三種方法（一步法）血清中的未知抗原與固相抗體和標志抗體同時反應。然后去除游離的標志抗體，測固相抗體一抗原一標志抗體復合物的放射性計數。

　　由于醫院收住著患有各種疾病的病人，醫院是病人集中的場所。可直接或間接地污染醫院環境。醫院的空氣、地面、用具、門、窗把手、水槽、水、醫療器械等皆可被病原微生物污染，甚至成為醫院內感染微生物的儲菌所。

　　越來越多的醫院已經認識到污染的環境外表在傳達病原微生物上發揮了重要的作用。Goodman2008指出，近年來。病原體污染環境，通常發生在日常的醫療過程中。許多研究已經描述了通過接觸污染的房間外表傳達病原體。Eckstein2007指出，感染或定植醫療相關病原體的病人，往往這些生物從他皮膚上脫落，并播散在環境中。盡管與病人直接接觸一般被認為 醫護人員的手獲得病菌并隨后傳達給其他病人的主要來源，然而近有幾項研究表明，受污染的環境外表也發揮著傳達病原體的重要作用。

　　標志抗原與定量抗體結合的復合物就少，主要特點：標志的抗原。其原理：未知抗原Ag+標志抗原Ag+已知定量抗體Ab標志抗原與抗體復合物AgA b+未知抗原與抗體復合物AgAb+游離標志抗原Ag去除）未知抗原多。表示為負相關）

　　根據加樣順序與溫育次數的區別，臨床上甲胎蛋白（AFP癌胚抗原（CEA 8一微球蛋白（pzMG鐵蛋白（Fer人絨毛膜促性腺激素p亞單位（HCG-13等的檢測都是競爭性RIA 法原理。競爭性RIA 法。反應方式分三種：平衡法，將非標記抗原（被測物與標準品）抗體、標志抗原依次加入反應管，混勻后一次性溫育至反應達到動態平衡，再加分離劑分離B復合物）與F游離物）如：AFP8一MGFer順序加樣法，先將非標記抗原（被測物與標準品）與抗體在反應管內作次溫育，待反應達到動態平衡后。加入標志抗原，再作第二次溫育后，分離B與F如：CEA 急診檢測法：為臨床急需檢測結果而提出的反應方式，不等RIA 反應達到動態平衡就終止反應；分離劑的選擇有，PEG聚乙二醇）第二抗體等。

　　固相抗體先與未知抗原結合，從加樣測定順序上看。再與標志抗體結合（正向兩步法）然后去除游離的標志抗體，測固相抗體一抗原一標志抗體復合物的放射性計數；未知抗原先與標志抗體結合，再與同相抗體結合（反向兩步法）然后去除游離的標志抗體，測固相抗體一抗原一標志抗體復合物的放射性計數；未知抗原與固相抗體和標志抗體同時反應（一步法，又稱同時加樣法）然后去除游離的標志抗體，測固相抗體一抗原一標志抗體復合物的放射性計數。