振動(dòng)圓二色光譜儀的原理是通過測(cè)量分子對(duì)圓偏振光的吸收情況來(lái)研究其結(jié)構(gòu)特性。具體來(lái)說,光源發(fā)出的線性偏振光被分解為左旋和右旋圓偏振光,經(jīng)過樣品時(shí),由于手性分子對(duì)不同偏振方向的吸收有所差異,導(dǎo)致光的吸收強(qiáng)度發(fā)生變化。這種吸收差異即為圓二色信號(hào),通常用以分析分子的二級(jí)結(jié)構(gòu)、分子折疊過程以及相互作用等。
振動(dòng)圓二色光譜儀的測(cè)定步驟:
-根據(jù)研究目的選擇相應(yīng)的溶劑,將待測(cè)的有機(jī)化合物溶解于其中,注意控制濃度。
-確保樣品中沒有雜質(zhì)或者其他干擾物。
-啟動(dòng),并按照廠家的指示預(yù)熱儀器至需求溫度。通常情況下,建議將儀器預(yù)熱至室溫。
-在樣品池中加入相同溶劑但不含有機(jī)化合物的空白樣品。
-按照儀器操作手冊(cè)的指示,進(jìn)行空白校準(zhǔn),以消除系統(tǒng)本底的影響。
-選擇合適的參考物質(zhì)(如D-葡萄糖酸鈉),將其溶解于相同溶劑中,加入樣品池。
-按照儀器操作手冊(cè)的指示進(jìn)行參考物質(zhì)校準(zhǔn)。
-根據(jù)樣品的性質(zhì)和研究目的,設(shè)置合適的操作參數(shù),如波長(zhǎng)范圍、光強(qiáng)等。
-將待測(cè)樣品溶液加入樣品池中,確保樣品池的表面平整且沒有氣泡。
-將樣品池放入樣品室中。
-按下開始測(cè)量按鈕,儀器會(huì)自動(dòng)記錄樣品的圓二色信號(hào)。
-在測(cè)量過程中,避免干擾,保持實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的穩(wěn)定。
-將測(cè)量得到的原始數(shù)據(jù)導(dǎo)出為適當(dāng)?shù)母袷健?br />
-根據(jù)儀器的響應(yīng)性能,對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行校正,消除背景噪聲等。
-根據(jù)所研究的問題和已有知識(shí),對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行合理的分析。
-根據(jù)數(shù)據(jù)分析結(jié)果,對(duì)樣品的結(jié)構(gòu)和構(gòu)象進(jìn)行解讀和討論,得出研究結(jié)論。

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