BioVectra cGMP TCEP-HCl:高效還原二硫鍵,助力生物工藝與藥物開發
在生物化學和藥物開發領域,還原劑的選擇至關重要。BioVectra的貨號1301產品——cGMP TRIS(2-CARBOXYETHYL) PHOSPHINE, HYDROCHLORIDE(cGMP TCEP-HCl)正是這樣一款高效、可靠的試劑。
BioVectra1301產品亮點:
1、高純度與cGMP級品質
cGMP TCEP-HCl純度≥99%,符合cGMP標準,適用于對質量要求很高的生物工藝和制藥生產。
2、高效還原能力
作為一款非硫醇還原劑,TCEP-HCl在還原二硫鍵方面表現出色,可在溫和條件下快速完成還原反應,且不產生異味。
3、廣泛適用性
適用于抗體藥物偶聯物(ADCs)的制備、蛋白質氧化反應以及多種生物化學實驗,是實驗室和工業生產的理想選擇。
4、多種規格
提供1g、5g、10g、100g等多種規格,滿足不同規模實驗和生產需求。
BioVectra1301應用場景:
1、抗體藥物開發:在ADCs制備中,TCEP-HCl可高效還原二硫鍵,確保藥物偶聯的高效性和穩定性。
2、蛋白質研究:用于蛋白質結構研究和功能分析,幫助科學家更好地理解生物分子的相互作用。
3、生物工藝優化:在重組蛋白生產和發酵過程中,TCEP-HCl可作為關鍵試劑,提升生產效率。
BioVectra1301使用方法和注意事項
1. 溶解與儲存
*溶解:TCEP-HCl(三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽)在水中極易溶解,溶解度可達 50 mg/mL。可以使用去離子水或適當的緩沖液溶解,推薦使用 Tris-HCl、HEPES 或 CAPS 緩沖液(pH 6.8-11.1),這些緩沖液中 TCEP-HCl 非常穩定。
*儲存:建議將 TCEP-HCl 儲存在密封容器中,室溫保存,避免氧化。
2. 使用濃度
*推薦濃度:對于大多數應用,5-50 mM 的 TCEP-HCl 足以在室溫下幾分鐘內還原多肽或蛋白質中的二硫鍵。例如,30 µM 的 TCEP-HCl 可在 40 秒內完q還原 20 µM 的二硫鍵。
*摩爾過量:通常建議使用過量的 TCEP-HCl(如 5-10 倍摩爾濃度)以確保完q還原。
3. 反應條件
*pH 范圍:TCEP-HCl 在 pH 1.5-9.0 的范圍內表現出良好的還原效果。在 pH < 8.0 時,其還原效果優于 DTT。
*溫度:室溫下即可完成還原反應,通常在幾分鐘內即可完成。
4. 兼容性
*與馬來酰亞胺反應:TCEP-HCl 不含硫醇,因此在進行馬來酰亞胺標記或交聯反應時無需去除。
*SDS-PAGE:可以替代 DTT 或 2-巰基yi醇用于 SDS-PAGE 樣品緩沖液,使用終濃度為 50 mM。
5. 注意事項
*磷酸鹽緩沖液:TCEP-HCl 在磷酸鹽緩沖液(PBS)中不穩定,尤其是在中性或堿性條件下,建議現配現用。
*金屬離子:避免與金屬接觸,因為金屬離子可能會降低 TCEP-HCl 的活性。
*后續處理:還原后的樣品應盡快使用,避免長時間放置導致二硫鍵重新形成。
BioVectra1301常見問題及解決方式
1.問題描述:TCEP-HCl 在中性或堿性磷酸鹽緩沖液中容易被氧化,導致還原效果下降。
? 解決方法:
現配現用:如果需要在 PBS 中使用 TCEP-HCl,建議在使用前立即配制工作液。
避免長時間暴露:盡量減少溶液在中性 pH 條件下的暴露時間。
2. 問題描述:TCEP-HCl 與金屬接觸后,活性可能會降低。
? 解決方法:
避免金屬接觸:在配制和使用過程中,盡量使用塑料或玻璃容器,避免使用金屬容器。
3. 問題描述:在某些情況下,TCEP-HCl 可能無法完q還原二硫鍵。
? 解決方法:
增加濃度:確保使用足夠的摩爾過量(通常是 5-10 倍摩爾濃度)。
延長反應時間:如果使用等摩爾濃度的 TCEP-HCl,反應時間可能需要延長。
優化 pH:確保反應體系的 pH 在 TCEP-HCl 的有效范圍內(pH 1.5-9.0),最佳 pH 為 6.8-8.0。
4.問題描述:TCEP-HCl 在儲存過程中可能會因氧化而失去活性。
? 解決方法:
密封保存:建議在室溫下密封保存,避免暴露在空氣中。
避免極d條件:避免長時間暴露在高溫或高濕度環境中。
5.問題描述:TCEP-HCl 帶正電荷,可能不適用于某些特定應用,如等電聚焦(IEF)。
? 解決方法:
選擇替代品:在等電聚焦等應用中,建議使用其他還原劑。
優化實驗條件:在其他兼容的應用中(如 SDS-PAGE),使用終濃度為 50 mM 的 TCEP-HCl。
6. 問題描述:TCEP-HCl 對人體有害,操作時需注意安全。
? 解決方法:
個人防護:操作時應穿戴實驗服、一次性手套,并在通風良好的環境中進行。
避免接觸和吸入:避免 TCEP-HCl 直接接觸皮膚或吸入體內。
BioVectra熱賣產品
貨號 | 品名 | 規格 | 品牌 |
1301-10g | cGMP TRIS(2-CARBOXYETHYL) PHOSPHINE, HYDROCHLORIDE (cGMP TCEP-HCl) | 10g | biovectra |
1301-1g | TCEP Tris (2-carboxyethyl) phosphine, hydrochloride – cGMP | 1g | biovectra |
1310-10g | DHAA Dehydroascorbic acid – cGMP | 10g | biovectra |
1365-100g | DTT | 100g | biovectra |
1370-100g | DTT Dithiothreitol (cGMP) | 100g | biovectra |
1370-1kg | DTT Dithiothreitol (cGMP) | 1kg | biovectra |
1365-500g | DTT | 500g | biovectra |
1900-100g | IPTG ISOPROPYL-β-D-THIOGALACTOPYRANOSIDE, NON-ANIMAL ORIGIN | 100g | biovectra |
1300-10g | TCEP Tris (2-carboxyethyl) phosphine, hydrochloride (non-cGMP) | 10g | biovectra |
1310-100g | DHAA Dehydroascorbic acid – cGMP | 100g | biovectra |
1365-25kg | 1,4-Dithiothreitol (DTT) 3483-12-3 | 25kg | biovectra |
1365MBG-1kg | DTT Dithiothreitol- Molecular Biology Grade | 1kg | biovectra |
1365-25g | DTT | 25g | biovectra |
1301-5g | TCEP Tris (2-carboxyethyl) phosphine, hydrochloride – cGMP | 5g | biovectra |
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