關鍵詞：BALB/c mouse，Liver Lysosomes，Oligonucleotides, Antibody-Drug Conjugate，ADC

隨著生物技術的不斷發展，小分子藥、小核苷酸藥及抗體藥等靶向抗腫瘤藥物的開發已取得重大進展，其中小核苷酸藥及ADC類藥物更是多家藥企開發抗腫瘤藥物的熱門首-選。體外代謝試驗是檢驗藥物穩定性及安全性的必要手段，而肝溶酶體是小核苷酸藥及ADC類藥物開發過程中不-可或-缺的體外代謝研究品。鑒于此，IPHASE作為體外研究生物試劑引-領者，繼成功研發人、食蟹猴、比格犬、SD大鼠、ICR/CD-1小鼠等不同種屬的肝溶酶體后，又成功研發出國內-首-家BALB/c小鼠肝溶酶體，為客戶開展藥物研發等試驗提供更多選擇。

一、溶酶體簡介

溶酶體（Lysosomes）是由Cristian de Duve等人于1955年在大鼠肝細胞中發現并確立其作為細胞中降解和代謝的中心細胞器，具有分解蛋白質、核酸及多糖等生物大分子的功能。溶酶體為單層膜包被的囊狀結構，形狀多種多樣，直徑約0.025~0.8um，其內含有蛋白酶、核酸酶、磷酸酶、糖苷酶、脂肪酶、磷酸酯酶及硫酸脂酶等60多種水解酶，需要由ATP驅動的質子泵與其他離子通道合作來維持酸性環境（pH 3.5-5.5）才能發揮作用。

圖1 溶酶體結構圖  來源于網絡

隨著生物技術的快速發展，溶酶體（Lysosomes）在藥物研發中的重要作用日益凸顯，尤其是小核苷酸藥物及ADC藥物，溶酶體是該類藥物開發過程中必-不-可少的體外研究模型。

二、溶酶體在小核酸藥及ADC藥物研發中的作用

1. 小核酸藥物與溶酶體

小核酸藥物，又稱寡核苷酸藥物（Oligonucleotides, ONs），指長度一般為18-30nt的可成藥的寡核苷酸。小核酸藥物包括小干擾RNA（small interfering RNA, siRNA）、反義寡核苷酸（Antisense oligonucleotide，ASO）、微小RNA（microRNA, miRNA）、小激活RNA（small activating RNA, saRNA）、信使RNA（messenger RNA, mRNA）、核酸適配體（Aptamer）和抗體核酸偶聯藥物（Antibody-oligonucleotide conjugates, AOC）等。當前研究的重點主要集中于ASO、siRNA 和Aptamer這三種小核酸藥物上。不同的寡核苷酸作用機制不同（圖2），它們在發病的不同階段發揮抑制劑的作用，ASO和siRNA作用于靶mRNA水平；Aptamer則直接抑制參與發病蛋白的活性。它們的共同點均為通過干預靶基因的表達以達到實現疾病治療的目的。

圖2 寡核苷酸的作用機制及作用位點

（來源：Delivery of oligonucleotide-based therapeutics: challenges and opportunities）

與傳統小分子藥物一樣，小核酸藥物在臨床前研究階段，通常需要進行體外代謝穩定性研究。而溶酶體是小核酸藥物進入細胞后的主要接觸的環境，酸性的溶酶體(pH 3.5-5.5)具有豐富的酶體系，包括核酸酶和各種水解酶等，是小核酸代謝的重要場所。因此，溶酶體可作為高效的試驗系統，在體外評估修飾后的小核酸藥經溶酶體代謝作用后穩定性的變化，為小核酸藥物的研究提供數據支持。

2. 抗體偶聯藥物（ADC）與溶酶體

抗體偶聯藥物（Antibody-Drug Conjugate，ADC）是通過連接子將小分子化合物偶聯至靶向性抗體或抗體片段上的一類新型的生物技術藥物（圖3），可以增強藥物靶向性和穩定性、減少臨床毒副反應、提高治療指數，兼具傳統小分子藥物的殺傷效應和抗體藥物的靶向性，主要應用于抗腫瘤或者其他疾病的靶向治療。

圖3 ADC藥物的結構和功能示意圖

（來源：Antibody drug conjugate: the“biological missile” for targeted cancer therapy）

ADC分子進入體內后，可通過單克隆抗體的導向作用與靶細胞表面的抗原結合，并進一步轉入靶細胞內，進入細胞內 (主要在溶酶體內) 的ADC分子，可通過化學/或酶促作用釋放小分子毒素和/或毒素類似物 (即效應分子) 以 “殺滅”靶細胞。ADC需要功能性溶酶體裂解連接子或充分降解抗體部分以釋放發揮藥效的小分子藥物，通過溶酶體膜滲透或轉運出溶酶體，與胞質或細胞核中的分子靶標相互作用。ADC藥物與溶酶體的體外實驗可以評估小分子藥物的釋放速率及程度，為ADC的設計提供體外評估工具。

三、BALB/c小鼠肝溶酶體的重要性

BALB/c小鼠是白變種實驗室老鼠，與眾多常用亞系一樣，起源于小家鼠（Mus musculus），1913年紐約紀念醫院的Halsey J. Bagg開始近交培育，1920年誕生，至今在全球研究機構繁衍了超過200代。BALB表示該品系的來源地為巴爾的摩(Baltimore)，c表示這些小鼠是白色的（c是毛色隱性上位recessive epistasis基因），指的是該品系的白化特征。

BALB/c小鼠體型適中，一般成年雄性BALB/c小鼠重量在25-30克，雌性BALB/c小鼠重量略輕。外表與“ICR”和“NIH”小鼠很難分辨，都長著一對紅寶石般的眼睛，被毛白色。但其耳朵相對較大、尾巴較長，眼睛較小且接近頭頂部位。另外，BALB/c鼠的遺傳背景為近交系，由親兄弟姐妹遺傳繁殖，因而它們之間的個體差異較小，遺傳基因更純。

BALB/c小鼠是常用近交系小鼠,其純合子遺傳背景減少了實驗結果的變異，提高了研究的準確性和可靠性。此外，BALB/c小鼠還具有獨-特的生理特性。

【癌癥敏感性】

BALB/c小鼠乳腺癌發病率相對較低，但隨著年齡增長，患其他癌癥（如肺癌和腎癌）的幾率增加。乳腺腫瘤發生率約為10%~20%，肺癌發病率雌性為26%，雄性為29%；白血病發病率雌性為12%，雄性為10%。

【血壓與心血管】

血壓與其他近交系小鼠相比為最高，有自發高血壓癥。老年小鼠心臟有某些病變，雌雄小鼠常有動脈硬化。

【免疫特性】

該小鼠沒有胸腺，因此沒有T淋巴細胞，存在免疫缺陷。多數個體于6月齡之后出現免疫球蛋白增多癥，主要是IgG1和IgA增多。補體活性高，干擾素產量低，對百日咳組織胺易感因子敏感。在BALB/cJ小鼠中α胎蛋白較高。

【敏感性】

對鼠傷寒沙門氏菌C5敏感，對麻疹病毒中度敏感，易患慢性肺炎，對放射線極度敏感。對礦物油誘導漿細胞瘤敏感。

【其他】

富于網狀內皮細胞的器官（如肝、脾）與體重相比，所占比值很大。生產性能好，繁殖期長，一般無相互侵襲習性，比較容易群養。

因此，BALB/c小鼠憑借其相對穩定的遺傳背景和獨-特的生理特性廣泛應用于多個研究領域，比如腫瘤學與核醫學、免疫學、生理學、遺傳學及單克隆抗體制備等，一直以來都是科學研究中的重要工具。此外，隨著精準醫療和個性化治療的發展，BALB/c小鼠在藥物研發和藥效評估中的應用也越來越廣泛。通過深入研究BALB/c小鼠的生理和遺傳特性，科研人員可以開發出更加安全、有效的藥物和治療方法，為人類健康事業做出更大的貢獻。

綜上所述，鑒于BALB/c小鼠在科研中的廣泛應用及溶酶體在藥物研發中的重要地位，開發其肝溶酶體對于相關醫學領域研究具有至關重要的意義。

四、IPHASE 相關產品

鑒于此，IPHASE作為體外研究生物試劑引-領者，憑借先進的設備、專業的技術人員和多年研發經驗，繼成功研發人、食蟹猴、比格犬、SD大鼠、ICR/CD-1小鼠等不同種屬的肝溶酶體后，又成功研發出國內-首-家BALB/c小鼠肝溶酶體，為客戶開展藥物研發等試驗提供更多選擇。

【高純度】

IPHASE肝溶酶體出廠均經酸性磷酸酶驗證，保證溶酶體純度。

【適用范圍廣】

 IPHASE肝溶酶體均檢測了組織蛋白酶B和核酸酶的活性，可同時滿足ADC類藥物和小核酸類藥物開發需求。

【批量生產 】

采用批量生產方式，庫充充足，可保證同一批次產品的供應。

【貨期短】

自主研發，國內現貨，保障客戶使用需求。

【售后服務機制健全 】

有專業技術人員提供全-方位服務。

除肝溶酶體外，肝S9和酸化肝勻漿液也是小核酸藥及ADC藥等藥物體外代謝研究的常用模型，IPHASE 可提供不同種屬的肝S9和酸化肝勻漿液，助力廣大客戶進行藥物開發研究。

IPHASE/匯智和源憑借多年的研發經驗，推出了多領域、多種類的高-端科研試劑，為藥物早期研發提供篩選工具，為生命科學領域的探索提供新材料、新方法和新手段，為食品、藥品、化學品等的遺傳毒性研究提供便捷產品，望廣大科研工作者咨詢。

參考資料：

[1] Suzan M Hammond, Annemieke Aartsma-Rus, Sandra Alves, et al.Delivery of oligonucleotide-based therapeutics: challenges and opportunities. EMBO Molecular Medicine.2021,13: e13243.

[2] Zhiwen Fu, Shijun Li, Sifei Han, et al. Antibody drug conjugate: the“biological missile” for targeted cancer therapy. Signal Transduction and Targeted Therapy.2022,7(1):93

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