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ColProof®質粒小量提取試劑盒 Col-P0101

來源:上海徠同生物科技有限公司   2025年02月20日 09:37  

ColProof®質粒小量提取試劑盒圖標+庫思擇

Col-P0101

 

試劑盒應用

本試劑盒采用硅膠膜吸附技術,高效專一地結合質粒DNA,操作簡單、快速。一次可處理1-4mL過夜培養的細菌培養液,最多可提取20µg質粒DNA。使用本試劑盒提取的質粒DNA超螺旋含量高,適合酶切、PCR、測序、連接轉化、文庫篩選、體外轉錄、轉染等實驗。

本試劑盒僅供研究使用,不可用于臨床、食品、化妝品等領域。

 

試劑盒組成

組分

Col-P010150T

編號

溶液P1

8mL

Col-P0101A

溶液P2

8mL

Col-P0101B

溶液P3

18mL

Col-P0101C

洗滌液PW

12mL


洗脫液PW

8mL


RNaseA溶液(10mg/mL)

80μL


吸附柱P

50

Col-P0101E

收集管(2mL

50

Col-P0101F

備注:

1、第一次使用前,在洗滌液PW中加入48mL無水乙醇,并標記“”和時間,避免重復加入。

2、若溶液產生沉淀,使用前可在37℃水浴中預熱10分鐘溶解沉淀。

3、獨立包裝的RNaseA溶液可在室溫保存12個月,使用前全部加入溶液P1中,混合均勻2-8℃保存6個月。

 

保存條件

室溫保存一年。

 

 

自備材料

無水乙醇

 

使用方法

1、取1-4mL過夜培養的細菌,加入離心管中,12,000rpm離心1分鐘收集細菌。盡可能去除上清。

2、加入150μL溶液P1使用前檢查是否已加入RNaseA溶液)至沉淀的離心管中,使用移液器輕輕吹打或渦旋振蕩器懸浮菌體。

3、向離心管中加入150μL溶液P2,溫和上下翻轉6-8次使菌體充分裂解。此時溶液變澄清。

注意:溫和混合,避免劇烈震蕩。

4、沿管壁向離心管中加入350μL溶液P3,快速上下翻轉6-8次,充分混勻,此時溶液出現絮狀沉淀。

512,000rpm離心5-10分鐘。

6、轉移550-600μL上清液至吸附柱P中(提前將吸附柱P置于收集管中),盡可能不要吸取到沉淀。

712,000rpm離心30秒。倒收集管中廢液,將吸附柱P放入收集管中。

8、加入500μL洗滌液PW使用前檢查是否已加入無水乙醇),12,000rpm離心30秒。倒收集管中廢液,將吸附柱P放入收集管中。

9、重復步驟8一次。

1012,000rpm離心1分鐘將洗滌液PW去除。

注意:盡可能將無水乙醇揮發wan全。

11、將吸附柱P置于干凈的離心管中,向吸附柱中間滴加50-100μL洗脫液PW

注意:洗脫液PW體積不低于50μL,以免影響回收效率。為了提高洗脫效率,可將洗脫液PW提前置于65℃水浴中再使用。

1212,000rpm離心1分鐘得到質粒DNA溶液。-20℃保存。

 

 


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