ColProof^®質(zhì)粒小量提取試劑盒

Col-P0101

試劑盒應(yīng)用

本試劑盒采用硅膠膜吸附技術(shù)，高效專(zhuān)一地結(jié)合質(zhì)粒DNA，操作簡(jiǎn)單、快速。一次可處理1-4mL過(guò)夜培養(yǎng)的細(xì)菌培養(yǎng)液，最多可提取20µg質(zhì)粒DNA。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA超螺旋含量高，適合酶切、PCR、測(cè)序、連接轉(zhuǎn)化、文庫(kù)篩選、體外轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)染等實(shí)驗(yàn)。

本試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床、食品、化妝品等領(lǐng)域。

試劑盒組成

備注：

1、第一次使用前，在洗滌液PW中加入48mL無(wú)水乙醇，并標(biāo)記“√”和時(shí)間，避免重復(fù)加入。

2、若溶液產(chǎn)生沉淀，使用前可在37℃水浴中預(yù)熱10分鐘溶解沉淀。

3、獨(dú)立包裝的RNaseA溶液可在室溫保存12個(gè)月，使用前全部加入溶液P1中，混合均勻2-8℃保存6個(gè)月。

保存條件

室溫保存一年。

自備材料

無(wú)水乙醇

使用方法

1、取1-4mL過(guò)夜培養(yǎng)的細(xì)菌，加入離心管中，12,000rpm離心1分鐘收集細(xì)菌。盡可能去除上清。

2、加入150μL溶液P1（使用前檢查是否已加入RNaseA溶液）至沉淀的離心管中，使用移液器輕輕吹打或渦旋振蕩器懸浮菌體。

3、向離心管中加入150μL溶液P2，溫和上下翻轉(zhuǎn)6-8次使菌體充分裂解。此時(shí)溶液變澄清。

注意：溫和混合，避免劇烈震蕩。

4、沿管壁向離心管中加入350μL溶液P3，快速上下翻轉(zhuǎn)6-8次，充分混勻，此時(shí)溶液出現(xiàn)絮狀沉淀。

5、12,000rpm離心5-10分鐘。

6、轉(zhuǎn)移550-600μL上清液至吸附柱P中（提前將吸附柱P置于收集管中），盡可能不要吸取到沉淀。

7、12,000rpm離心30秒。倒收集管中廢液，將吸附柱P放入收集管中。

8、加入500μL洗滌液PW（使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇），12,000rpm離心30秒。倒收集管中廢液，將吸附柱P放入收集管中。

9、重復(fù)步驟8一次。

10、12,000rpm離心1分鐘將洗滌液PW去除。

注意：盡可能將無(wú)水乙醇揮發(fā)wan全。

11、將吸附柱P置于干凈的離心管中，向吸附柱中間滴加50-100μL洗脫液PW。

注意：洗脫液PW體積不低于50μL，以免影響回收效率。為了提高洗脫效率，可將洗脫液PW提前置于65℃水浴中再使用。

12、12,000rpm離心1分鐘得到質(zhì)粒DNA溶液。-20℃保存。