紅細胞裂解液是一種去除紅細胞簡便易行的方法,即用裂解液裂解紅細胞,它既不損傷有核細胞又能充分的去除紅細胞。裂解液裂解是一種比較溫和的紅細胞去除方法,主要用于經酶消化分散的組織細胞的分離純化,淋巴細胞的分離純化以及組織細胞蛋白與核酸提取等實驗中紅細胞的去除。
原理說明
利用細胞內外的離子濃度差異,形成滲透壓差,外部的水分會擴散至細胞內,使紅細胞膨脹,達到裂解的效果。
使用方法
1.裂解紅細胞
(1) 向 1 份待裂解的新鮮全血中加入 3 倍體積的紅細胞裂解液(如 1mL 新鮮全血加入 3mL 紅細胞裂解液)輕輕渦旋或顛倒混勻。【注】:如果對新鮮組織細胞進行處理需經胰酶等消化成單個細胞懸液后離心收集細胞后再進行后續操作。
(2) 冰上孵育 15 min,其間輕輕渦旋混勻 2 次。【注】:紅細胞裂解后,溶液應該是清亮透明的。
2.收集白細胞
(1)在 4℃,450×g 離心 10 min 收集白細胞,小心吸棄上清液。
(2) 向以上沉淀中加入兩倍體積的紅細胞裂解液,輕輕渦旋充分重懸白細胞(例如起始血液為 1 mL,則加入 2 mL 的紅細胞裂解液)。
(3) 在 4℃,450×g 離心 10 min 收集白細胞,小心并吸去上清液。
(4) 重懸細胞,用于后續實驗。【注】:如提取 RNA,最好從此步開始使用無 RNase 的溶液進行。
紅細胞裂解液產品
[名稱] 李記生物
[名稱] 紅細胞裂解液
[貨號] AP01L106
[規格] 100mL
相關產品
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。