抗酸細菌(AFB)，即分枝菌酸(細胞包膜中的脂質)含量高的細菌，使用抗酸染色進行檢測。這些染色區分了AFB，AFB導致諸如肺結核和其他呼吸系統疾病的疾病。AFB通常在特殊的實驗室環境中進行測試，因為這些疾病具有高度傳染性。無論你測試的是手術標本、呼吸道標本還是痰液標本，這些方案中的兩種復染劑要么是亮綠，要么是亞甲藍；為不耐酸的生物體提供不同的外觀。您的病理學家的偏好將決定您應該使用哪種抗酸染色顏色。

此外，這種染色有兩種變化——冷染色法(Kinyoun)或熱法(澤赫爾·尼爾森)。最初的澤赫爾·尼爾森方法更傳統，而金永法由于不需要加熱而越來越受歡迎。

抗酸染色

抗酸染色用于鑒定抗酸微生物。這些細菌將被方案染成紅色。

抗酸染色(金永或澤赫爾·尼爾森)協議

1. Fix the slide.

2. Kinyoun (cold method)

   :淹沒載玻片或浸沒在Kinyoun石炭酸品紅溶液中:5分鐘

   澤赫爾·尼爾森(熱法)

   :淹沒載玻片或浸沒在澤赫爾尼森石炭酸品紅溶液中，加熱:3分鐘

可以使用載玻片架或染色單個載玻片。

3. 用去離子水輕輕沖洗。
4. 使用脫色劑溶液去除大部分污漬，直到洗滌液變得清澈。
5. 用去離子水輕輕沖洗。
6. 將載玻片浸入亞甲藍溶液或亮綠溶液中30秒至1分鐘。
7. 用去離子水輕輕沖洗，然后風干。
8. 相應地檢查幻燈片。

抗酸微生物被染成紅色，而非抗酸微生物和背景被染成綠色或藍色。分枝桿菌的一個主要特征是它們是“抗酸的”,一旦用苯胺染料，堿性品紅染色，它們很難脫色，因此即使暴露于酸性酒精漂洗中也能保持紅色。

石炭酸品紅被用作抗酸生物的主要染料，因為它在細胞壁脂質中比在酸性醇中更易溶解，所以生物將保留染料的紅色。如果你發現抗酸細菌沒有像預期的那樣保持顏色，請閱讀我們關于如何修復不保持染料的抗酸細菌的帖子。

Kinyoun方法也可以修改為弱酸快速染色，它使用5%的硫酸而不是鹽酸。除了對分枝桿菌染色外，弱酸性抗酸染色將對脫色后不能保持石炭酸品紅的生物體進行染色。

抗酸染色——Ziehl Neelsen