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三維(3D)凝膠制備方法

來源:北京博蕾德科技發展有限公司   2024年08月12日 14:40  

三維(3D)凝膠制備方法

背景簡介:

膠原蛋白是脊椎動物體內豐富的蛋白質,存在于皮膚、軟骨、骨、椎間盤、血管、肌腱、韌帶和角膜中,是細胞外基質(ECM)的主要成分。I型膠原由兩條相同的α1鏈和一條不同的α2鏈(1)組成,形成稱為原膠原的三螺旋結構。這種三螺旋構象增加了組織的結構強度和抗酶降解能力,在形成細胞外基質過程中起著關鍵作用。

膠原蛋白有助于促進組織再生和/或靶向藥物釋放,因為它具有低抗原性,低毒、高水溶性、高生物降解性。I型膠原結合整合素,促進細胞遷移、附著以及增殖和分化。盡管通過胃蛋白酶消化從原膠原中去除N-C-末端原膠原被廣泛用于工業用途,但原膠原作為含有交聯末端肽的天然膠原支架可能是有益的。

Chondrex公司提供酸性I型原膠原溶液,可用于傳統的二維(2D)系統以及三維(3D)凝膠中的支架,用于模擬成纖維細胞和軟骨細胞中的細胞生長。

品牌

Chondrex

貨號

1203

產品名稱

可溶性I型膠原

應用

用于傳統的二維(2D)系統以及三維(3D)凝膠中的支架,用于模擬成纖維細胞和軟骨細胞中的細胞生長。

規格

4 mg/ml x 12.5 ml (sterile filtered)

形態

溶于0.01M HCL

來源

內毒素

1 EU/ml

純度

95% I 膠原

保存

4

穩定性

6

操作流程

包被(注:具體的包被的條件需要根據培養系統優化

1.0.02mol/L的鹽酸稀釋4mg/ml的膠原到50-100ug/ml

2.溫和混勻稀釋后的溶液。

3.取適量的稀釋后的膠原加入孔內或板內。

注:保證整個表面都是包被的。

4. 37℃或室溫孵育1-2小時

5. 棄掉所有溶液。

6.用培養基或者PBS漂洗包被表面。

7.包被好的孔或板2-8℃保存或者空氣中晾干(如果保持無菌)

三維凝膠制備流程:

  1. PBS等體積稀釋膠原溶液,終濃度2mg/ml

  2. 加入適量的稀釋后的膠原到孔內或板內。

  3. 37℃孵育30~60分鐘。

  4. 凝膠可以2-8℃保存或者空氣中晾干(如果保持無菌)。


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