手機版
化工儀器網手機版
化工儀器網小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關注視頻號
細胞復蘇是指將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細胞解凍之后重新培養，細胞恢復生長的過程。當恢復到常溫狀態時，細胞的形態結構保持正常，生化反即刻恢復。細胞復蘇過程升溫要快，原則是慢凍快融，防止在解凍過程中水分進入細胞，形成冰晶，影響細胞存活。下面讓我們一起來看看細胞復蘇實驗的操作步驟與注意事項吧！
一、操作步驟
1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；
2.預熱培養基；
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；
4.將凍存細胞從液氮罐中取出；
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；
7.吸取9ml培養基到50ml離心管中；
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；
9.1000r/min,離心5min；
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；
11.吸棄上清液；
12.吸取1ml培養基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養瓶內，補加適量培養基，輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻，并做好標記；
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態；
14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。
二、注意事項
1.從液氮罐中取出細胞時，應做好個人防護以免凍傷；
2.凍存細胞取出后，如不能立即放入水浴鍋中融化，需將其放在干冰上保存轉移；
3.細胞水浴解凍時間以1min內為宜，做到慢凍速融；
4.已解凍的細胞避免長時間常溫存放，需盡快離心去除DMSO；
5.剛復蘇的細胞貼壁尚不牢固，24h內不要頻繁觀察和換液；
6.將培養瓶放入培養箱，并將瓶蓋旋松，以便進行充分的氣體交換(如使用透氣性瓶蓋，則無需旋松瓶蓋)。
更多有關細胞復蘇實驗的操作步驟與注意事項，請聯系天津益元利康生物科技有限公司！
免責聲明
- 凡本網注明“來源：化工儀器網”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品，未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的，應在授權范圍內使用，并注明“來源：化工儀器網”。違反上述聲明者，本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源（非化工儀器網）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品第一來源，并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。
采購中心