十問十答|關(guān)于液相色譜柱使用中的常見問題解答(二)
第三期
關(guān)于液相色譜柱使用中的常見問題解答(二)
上一期的十問十答液相柱篇主要給大家總結(jié)了常見液相柱使用中的問題與解答。
本期小編繼續(xù)為大家講解的是關(guān)于特殊色譜柱使用上的常見問題。
Question 1. ShimNex HE SAX/SCX以及WP SAX/SCX色譜柱怎么活化?
1. 需要使用至少20倍柱體積的流動(dòng)相平衡色譜柱。
2. 當(dāng)流動(dòng)相中緩沖鹽濃度較高時(shí)候,為了防止鹽在色譜柱或系統(tǒng)中析出,可使用20%的乙腈水溶液沖洗5倍以上柱體積作為緩沖,再過渡到流動(dòng)相。
3. 因?yàn)镾CX色譜柱鍵合的基團(tuán)是磺酸基團(tuán),容易與醇類物質(zhì)發(fā)生酯化反應(yīng),所以流動(dòng)相應(yīng)當(dāng)避免醇的使用。
氰基柱既可以用在正相模式,又可以用于反相模式。考慮到色譜柱壽命,推薦使用過程中固定為其中一種模式。因色譜柱出廠時(shí)使用庚烷:乙酸乙酯=90:10進(jìn)行質(zhì)控,所以如需要使用反相模式,請(qǐng)先使用異丙醇等將柱內(nèi)的溶劑進(jìn)行充分置換后再用相應(yīng)的流動(dòng)相進(jìn)行活化操作。
Question 3. C4 色譜柱怎么活化?
一般C4色譜柱的活化參照C18色譜柱,首次使用色譜柱前,應(yīng)先用20倍柱體積以上的甲醇/乙腈充分活化。為確保數(shù)據(jù)的質(zhì)量,分析前應(yīng)使用至少 10 倍柱體積的流動(dòng)相平衡色譜柱。 若流動(dòng)相中緩沖鹽濃度較高, 為了防止鹽在色譜柱或系統(tǒng)中析出,應(yīng)先使用與流動(dòng)相構(gòu)成比例相同或有機(jī)相比例較低的水溶液沖洗至少 5 倍柱體積,再過渡到流動(dòng)相。
Question 4. ShimNex HE SAX/SCX以及WP SAX/SCX怎么沖洗?
硅膠基質(zhì)的離子交換色譜柱一般流失比較嚴(yán)重,壽命一般不是很好。所以色譜柱的清洗維護(hù)非常重要。色譜柱的污染可能會(huì)導(dǎo)致峰形的變化、峰分裂、肩峰、柱效的變化或背壓增加等問題。請(qǐng)參考以下方法進(jìn)行清洗:
Question 5. 硅膠基質(zhì)色譜柱的保存有什么注意事項(xiàng)?
Question 6. 氨基酸分析儀中,使用的Amino Na/Li型色譜柱,色譜柱怎么活化?
在使用長期停止使用的色譜柱之前,用0.2M氫氧化鈉水溶液沖洗數(shù)小時(shí)。
Question 7. 氨基酸分析儀中,使用的Shim-pack Amino Na/Li型色譜柱,色譜柱臟了的時(shí)候怎么沖洗?
Question 8. 使用的Amino Na/Li型色譜柱,色譜柱怎么保存?
如果色譜柱超過半年不使用,建議使用以下流動(dòng)相沖洗保存:
使用0.2M的氫氧化鈉(氫氧化鋰)水溶液清洗色譜柱,用0.01%的辛酸的10%乙醇溶液置換色譜柱,最后將色譜柱保存在陰暗地方。
Question 9. Shim-pack Amino系列色譜柱有什么注意事項(xiàng)?
有機(jī)相比例不高于10%,避免高溫停泵(0.1-0.3 ml/min降至室溫后再停泵)。
Question 10. Shim-pack Amino Na型和Li型色譜柱有什么區(qū)別?
Shim-pack Amino-Na:大概可分析19個(gè)化合物,一針分析時(shí)間為90分鐘,分析速度快,化合物少;
Shim-pack Amino-Li:大概可分析38個(gè)化合物,一針分析時(shí)間為180分鐘,分析速度慢,化合物多。
各位小伙伴如有更多關(guān)于液相柱選型相關(guān)問題或有更多相關(guān)知識(shí)補(bǔ)充,歡迎留言與我們交流。
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