摘要：本實(shí)驗(yàn)方法旨在介紹如何使用Solentim STUDIUS細(xì)胞成像分析儀進(jìn)行細(xì)胞IgG 產(chǎn)率評(píng)估。本方法詳細(xì)描述了從鋪板到生長(zhǎng)過程中的產(chǎn)率分析、排名和選擇的全過程，以及STUDIUS在細(xì)胞系開發(fā)中的應(yīng)用價(jià)值。

關(guān)鍵詞：Solentim STUDIUS，細(xì)胞成像分析儀，細(xì)胞IgG產(chǎn)率，實(shí)驗(yàn)方法

在生物制藥領(lǐng)域，細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已成為生產(chǎn)重組蛋白類藥物的關(guān)鍵步驟。其中，細(xì)胞IgG產(chǎn)率的評(píng)估對(duì)于優(yōu)化生產(chǎn)過程和提高產(chǎn)量具有重要意義。Solentim STUDIUS細(xì)胞分析儀作為一種數(shù)字化時(shí)代的實(shí)驗(yàn)室儀器，它具備樣本追蹤、自動(dòng)分類、即時(shí)分類、避免人為錯(cuò)誤和自動(dòng)創(chuàng)建單克隆性報(bào)告等功能，為細(xì)胞IgG產(chǎn)率評(píng)估提供了高效、準(zhǔn)確的解決方案。

使用Solentim STUDIUS細(xì)胞分析儀進(jìn)行細(xì)胞IgG產(chǎn)率評(píng)估的詳細(xì)實(shí)驗(yàn)方法步驟如下：

一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備

1. 實(shí)驗(yàn)材料：細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞懸液、IgG檢測(cè)試劑盒。

2. 實(shí)驗(yàn)儀器：Solentim STUDIUS細(xì)胞分析儀、細(xì)胞培養(yǎng)箱、離心機(jī)、酶標(biāo)儀。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)板的準(zhǔn)備：選擇適合細(xì)胞生長(zhǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)板，并根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行滅菌處理。

4. 細(xì)胞懸液的準(zhǔn)備：從細(xì)胞庫(kù)中取出目標(biāo)細(xì)胞株，進(jìn)行復(fù)蘇和擴(kuò)增，調(diào)整細(xì)胞密度至所需的接種密度。

3. IgG檢測(cè)試劑盒的準(zhǔn)備：根據(jù)試劑盒說明書，準(zhǔn)備所需的試劑和標(biāo)準(zhǔn)品。

4. Solentim STUDIUS細(xì)胞分析儀的準(zhǔn)備：開啟儀器，進(jìn)行系統(tǒng)自檢和校準(zhǔn)。

二、細(xì)胞鋪板

1. 將準(zhǔn)備好的細(xì)胞懸液按照預(yù)定的接種密度鋪板到細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔加入適量的細(xì)胞懸液。

2. 輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)板，使細(xì)胞均勻分布。為保證細(xì)胞鋪板均勻，可以使用Solentim VIPS進(jìn)行全自動(dòng)鋪板驗(yàn)證。

3. 將細(xì)胞培養(yǎng)板放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中，根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)需求設(shè)定適宜的培養(yǎng)條件（如溫度、濕度、CO2濃度等）。

三、細(xì)胞培養(yǎng)與成像分析

1. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的時(shí)間點(diǎn)，使用Solentim STUDIUS細(xì)胞分析儀對(duì)細(xì)胞進(jìn)行成像分析。

2. 在成像分析前，根據(jù)儀器操作手冊(cè)進(jìn)行參數(shù)設(shè)置，包括成像區(qū)域、曝光時(shí)間、分辨率等。

3. 將細(xì)胞培養(yǎng)板放入STUDIUS儀器中，啟動(dòng)成像分析程序。

4. 儀器將自動(dòng)對(duì)每個(gè)孔進(jìn)行成像，并記錄細(xì)胞的形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)等數(shù)據(jù)。

5. 成像分析完成后，儀器將生成彩色節(jié)點(diǎn)，代表細(xì)胞生長(zhǎng)過程中的關(guān)鍵時(shí)間點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)數(shù)據(jù)跟蹤和審計(jì)追蹤。

四、IgG產(chǎn)量檢測(cè)

1. 根據(jù)IgG檢測(cè)試劑盒說明書，收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液。

2. 將上清液進(jìn)行適當(dāng)稀釋，以便于酶標(biāo)儀檢測(cè)。

3. 使用酶標(biāo)儀，根據(jù)試劑盒提供的檢測(cè)方法，對(duì)上清液中的IgG含量進(jìn)行定量檢測(cè)。

4. 記錄檢測(cè)結(jié)果，包括吸光度值、IgG濃度等。

五、數(shù)據(jù)處理與分析

1. 將STUDIUS成像分析結(jié)果與IgG產(chǎn)量檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行關(guān)聯(lián)，建立細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)與IgG產(chǎn)率之間的關(guān)系。

2. 利用STUDIUS的數(shù)據(jù)分析功能，對(duì)細(xì)胞克隆進(jìn)行排名和選擇，篩選出高IgG產(chǎn)率的細(xì)胞克隆。

3. 分析數(shù)據(jù)，生成報(bào)告，為后續(xù)實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)過程提供參考。

六、實(shí)驗(yàn)結(jié)束

1. 關(guān)閉Solentim STUDIUS細(xì)胞分析儀，進(jìn)行日常維護(hù)和清潔。

2. 處理實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的廢物，如廢棄的細(xì)胞培養(yǎng)板、試劑等。

3. 記錄實(shí)驗(yàn)過程中的關(guān)鍵參數(shù)和結(jié)果，整理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

通過以上詳細(xì)實(shí)驗(yàn)方法步驟，使用Solentim STUDIUS細(xì)胞分析儀進(jìn)行細(xì)胞IgG產(chǎn)率評(píng)估，可以實(shí)現(xiàn)從鋪板到生長(zhǎng)過程中的產(chǎn)率分析、排名和選擇的全過程，提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和效率。

七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

1. 產(chǎn)率分析結(jié)果：STUDIUS細(xì)胞分析儀可實(shí)時(shí)追蹤細(xì)胞生長(zhǎng)過程，通過彩色節(jié)點(diǎn)記錄關(guān)鍵時(shí)間點(diǎn)的數(shù)據(jù)。通過對(duì)細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)速度等參數(shù)的分析，可初步評(píng)估細(xì)胞IgG產(chǎn)率。

2. IgG產(chǎn)量檢測(cè)結(jié)果：酶標(biāo)儀檢測(cè)結(jié)果顯示，不同細(xì)胞克隆的IgG產(chǎn)量存在較大的差異。將檢測(cè)結(jié)果與STUDIUS成像分析結(jié)果進(jìn)行關(guān)聯(lián)，可進(jìn)一步優(yōu)化細(xì)胞克隆的選擇。

3. 數(shù)據(jù)處理與分析結(jié)果：利用STUDIUS的數(shù)據(jù)分析功能，對(duì)細(xì)胞克隆進(jìn)行排名和篩選。結(jié)合IgG產(chǎn)量檢測(cè)結(jié)果，篩選出高IgG產(chǎn)率的細(xì)胞克隆，為后續(xù)生產(chǎn)過程提供優(yōu)質(zhì)種子。

八、討論與總結(jié)

本實(shí)驗(yàn)方法使用Solentim STUDIUS細(xì)胞分析儀進(jìn)行細(xì)胞IgG產(chǎn)率評(píng)估，實(shí)現(xiàn)了從鋪板到生長(zhǎng)過程中的產(chǎn)率分析、排名和選擇的全過程。STUDIUS具備的數(shù)據(jù)跟蹤、審計(jì)追蹤和多級(jí)密碼保護(hù)用戶訪問等功能，為細(xì)胞系開發(fā)提供了可靠工具。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，STUDIUS在細(xì)胞IgG產(chǎn)率評(píng)估方面具有較高的準(zhǔn)確性和效率。

在使用STUDIUS進(jìn)行細(xì)胞IgG產(chǎn)率評(píng)估的過程中，應(yīng)注意以下幾點(diǎn)：

1. 細(xì)胞鋪板密度：根據(jù)細(xì)胞類型和生長(zhǎng)特性，選擇適當(dāng)?shù)匿伆迕芏龋员ＷC細(xì)胞正常生長(zhǎng)和產(chǎn)率評(píng)估的準(zhǔn)確性。

2. 成像分析時(shí)間點(diǎn)：根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)速度和產(chǎn)率變化，合理設(shè)置成像分析時(shí)間點(diǎn)，以捕捉關(guān)鍵時(shí)期的細(xì)胞狀態(tài)。

3. 數(shù)據(jù)關(guān)聯(lián)與分析：將STUDIUS成像分析結(jié)果與IgG產(chǎn)量檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行關(guān)聯(lián)，綜合評(píng)估細(xì)胞IgG產(chǎn)率。利用STUDIUS的數(shù)據(jù)分析功能，優(yōu)化細(xì)胞克隆的選擇。

使用Solentim STUDIUS細(xì)胞成像分析儀進(jìn)行細(xì)胞IgG產(chǎn)率評(píng)估的方法，為生物制藥領(lǐng)域提供了高效、準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)手段。通過對(duì)細(xì)胞克隆的產(chǎn)率分析、排名和選擇，有助于提高重組蛋白類藥物的生產(chǎn)效率和質(zhì)量。

蘇州阿爾法生物提供的STUDIUS通過整合來自VIPS PRO單細(xì)胞鋪板、Cell Metric®單克隆驗(yàn)證和克隆生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)以及ICON™的IgG產(chǎn)率評(píng)估，幫助科學(xué)家能夠更快、更自信地做出決策。該軟件平臺(tái)根據(jù)用戶定義的參數(shù)自動(dòng)、即時(shí)地分析數(shù)據(jù)，縮短了克隆的排名和選擇所需的時(shí)間。