為什么細(xì)胞培養(yǎng)基有那么多不同的名字?常見的1640和DMEM有什么不同?培養(yǎng)基應(yīng)該如何儲(chǔ)存?
這一期我們講講細(xì)胞培養(yǎng)所用到的培養(yǎng)基。
01 為什么細(xì)胞培養(yǎng)基有那么多不同的名字?
培養(yǎng)基有很多不同的名字是因?yàn)楦鶕?jù)不同細(xì)胞的培養(yǎng)和應(yīng)用場(chǎng)景,培養(yǎng)基可以分為多種類型,最常見的是DMEM、RPMI-1640、MEM等。
這些培養(yǎng)基有自己的配方特點(diǎn)和適用范圍。例如,DMEM適用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng),而RPMI-1640則適用于淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)。
此外,還有一些專門用于特定類型細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)基,如神經(jīng)元培養(yǎng)基、肌肉細(xì)胞培養(yǎng)基等。
培養(yǎng)基是直接購買還是自己配制比較合適呢?我的建議是:常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)直接采購商品化的培養(yǎng)基使用。
商品化的培養(yǎng)基通常以即用型的液體形式或粉劑形式提供。
這種培養(yǎng)基通常用于常見的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,只要按照合適比例加入血清,就成為了血清培養(yǎng)基,就可以應(yīng)用于細(xì)胞的日常培養(yǎng)、細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、細(xì)胞凋亡等實(shí)驗(yàn)中。
剛才提到的DMEM、RPMI-1640、MEM等培養(yǎng)基經(jīng)常是以這種即用型的液體或粉劑形式提供給實(shí)驗(yàn)操作者的。
此外,除了這些特定配方的即用型培養(yǎng)基意外,還有定制型的培養(yǎng)基,它是指需要根據(jù)特定的配方和比例來自行配制的培養(yǎng)基。
這種培養(yǎng)基通常用于一些特殊的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中,如原代細(xì)胞培養(yǎng)、干細(xì)胞培養(yǎng)等。需要配制的培養(yǎng)基通常包括無血清培養(yǎng)基、低血清培養(yǎng)基、添加了特殊因子的培養(yǎng)基等。
這些就需要根據(jù)各自的特殊項(xiàng)目而制定針對(duì)性的培養(yǎng)條件了。
02 常見的1640和DMEM有什么不同?
下面我們以實(shí)驗(yàn)室最常見的DMEM和RPMI-1640為例,來介紹它們之間的不同之處。
DMEM是一種最經(jīng)常應(yīng)用的細(xì)胞培養(yǎng)基之一,它是由Eagle于1959年開發(fā)出來的,后由Dulbecco進(jìn)行了改良。
DMEM主要適用于肝臟、腎臟、肺、心臟等多種類型的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的培養(yǎng)。DMEM中含有較高濃度的葡萄糖(4500mg/L)、氨基酸、維生素和微量元素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
此外,DMEM還添加了丙酮酸和乳酸等緩沖劑,能夠保持細(xì)胞在較寬的pH范圍內(nèi)正常生長(zhǎng)。
RPMI-1640(Roswell Park Memorial Institute medium 1640)是一種由Roswell Park紀(jì)念研究所開發(fā)的細(xì)胞培養(yǎng)基,適用于淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、白血病細(xì)胞等多種類型的哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的培養(yǎng)。
RPMI-1640中含有較低濃度的葡萄糖(2000mg/L)、氨基酸、維生素和微量元素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
此外,RPMI-1640還添加了緩沖劑HEPES和碳酸氫鹽,能夠保持細(xì)胞在較窄的pH范圍內(nèi)正常生長(zhǎng)。
DMEM和RPMI-1640在營(yíng)養(yǎng)成分和緩沖劑的配比上有所不同,上述提到它們各自適合培養(yǎng)的細(xì)胞種類是經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證得到的結(jié)果,建議同學(xué)們遵照?qǐng)?zhí)行即可。
但這也并不代表用錯(cuò)了培養(yǎng)基細(xì)胞就一定會(huì)死掉,因?yàn)镈MEM和1640只是在少數(shù)成分上做了針對(duì)優(yōu)化,對(duì)于大部分細(xì)胞株,即使用錯(cuò),也只是不那么合適而已。
03 購買回來的培養(yǎng)基應(yīng)該如何儲(chǔ)存?
培養(yǎng)基是一種含有大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的復(fù)雜溶液,其成分非常容易受到環(huán)境的影響而發(fā)生變化。因此,在儲(chǔ)存和使用培養(yǎng)基時(shí)需要注意以下幾點(diǎn):
溫度:有條件的情況下,培養(yǎng)基應(yīng)該儲(chǔ)存在4°C冰箱中,避免暴露在高溫環(huán)境中。此外,在使用前需要將培養(yǎng)基恢復(fù)到室溫。
光照:培養(yǎng)基應(yīng)該避免暴露在陽光下或強(qiáng)烈的熒光燈下,以免造成成分變化。
消毒:在使用前需要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行消毒處理,以避免細(xì)菌和病毒污染。
儲(chǔ)存時(shí)間:一般來說,開封后的培養(yǎng)基應(yīng)該在一個(gè)月內(nèi)使用完畢,以避免成分變化造成影響。
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