超高效液相色譜儀是一種高分離效能、高靈敏度、快速分析的液相色譜技術,主要用于分析高分子化合物、蛋白質、多肽、核酸等復雜樣品。其原理是在經典液相色譜法的基礎上,通過引入氣相色譜理論,采用小顆粒高柱效的固定相,高壓輸液泵輸送流動相,以提高液相色譜的分離效能和速度。許多實驗室都將傳統的高效液相色譜法轉換為快速的超高效液相色譜法。
2、流動相準備:超高效液相色譜儀需要使用高質量的流動相,流動相需要經過過濾和脫氣處理。在使用前應準備好所需的流動相,并確保其質量和純度符合要求。
3、樣品處理:在進行分析前,需要將樣品進行處理,以適應超高效液相色譜儀的分析要求。例如,如果樣品是固體或半固體,需要進行萃取或研磨等處理步驟,以便將其溶解在流動相中。
4、色譜柱安裝與平衡:在開始分析前,需要安裝色譜柱,并進行平衡。確保色譜柱的接口正確連接,避免出現漏液等問題。平衡色譜柱是為了確保其性能穩定,提高分析結果的準確性。
5、設置參數:在開始分析前,需要設置超高效液相色譜儀的參數,例如流速、波長、進樣量等。這些參數需要根據樣品和流動相的特性進行選擇,以確保最佳的分析效果。
6、開始分析:在所有準備工作完成后,可以開始進行分析。在分析過程中,需要監控超高效液相色譜儀的性能,如基線穩定性、色譜峰形等,以確保分析結果的可靠性。
7、數據處理:分析完成后,需要處理數據以獲得所需的結果??梢允褂霉ぷ髡咀詭У能浖M行數據處理,如峰識別、定量分析等。
8、關機:完成分析后,需要按照正確的順序關閉超高效液相色譜儀。首先關閉檢測器,然后依次關閉泵和儀器電源。在關閉儀器之前,需要確保所有的管路都已經清洗干凈,避免殘留物對儀器造成損害。
9、最后,需要定期進行儀器維護和保養,以確保其性能和穩定性。
有關超高效液相色譜儀的使用,建議如下:
1、開機:首先打開儀器的主電源,等待儀器自檢完成后,雙擊桌面上軟件圖標,打開工作站。2、流動相準備:超高效液相色譜儀需要使用高質量的流動相,流動相需要經過過濾和脫氣處理。在使用前應準備好所需的流動相,并確保其質量和純度符合要求。
3、樣品處理:在進行分析前,需要將樣品進行處理,以適應超高效液相色譜儀的分析要求。例如,如果樣品是固體或半固體,需要進行萃取或研磨等處理步驟,以便將其溶解在流動相中。
4、色譜柱安裝與平衡:在開始分析前,需要安裝色譜柱,并進行平衡。確保色譜柱的接口正確連接,避免出現漏液等問題。平衡色譜柱是為了確保其性能穩定,提高分析結果的準確性。
5、設置參數:在開始分析前,需要設置超高效液相色譜儀的參數,例如流速、波長、進樣量等。這些參數需要根據樣品和流動相的特性進行選擇,以確保最佳的分析效果。
6、開始分析:在所有準備工作完成后,可以開始進行分析。在分析過程中,需要監控超高效液相色譜儀的性能,如基線穩定性、色譜峰形等,以確保分析結果的可靠性。
7、數據處理:分析完成后,需要處理數據以獲得所需的結果??梢允褂霉ぷ髡咀詭У能浖M行數據處理,如峰識別、定量分析等。
8、關機:完成分析后,需要按照正確的順序關閉超高效液相色譜儀。首先關閉檢測器,然后依次關閉泵和儀器電源。在關閉儀器之前,需要確保所有的管路都已經清洗干凈,避免殘留物對儀器造成損害。
9、最后,需要定期進行儀器維護和保養,以確保其性能和穩定性。
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