革蘭氏染色中初染液和復(fù)染液能否顛倒使用

來源：上海吉至生化科技有限公司 2023年12月20日 13:29

革蘭氏染色中初染液和復(fù)染液不能顛倒使用。

碘液要與結(jié)晶紫形成絡(luò)合物，才能卡在革蘭氏陽性細(xì)胞壁內(nèi)。

革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、復(fù)染等四個(gè)步驟，具體操作方法是：

（1）載玻片固定。在無菌操作條件下，用接種環(huán)挑取少量細(xì)菌于干凈的載玻片上涂布均勻，在火焰上加熱以殺死菌種并使其粘附固定。

（2）草酸銨結(jié)晶紫染1分鐘。

（3）自來水沖洗，去掉浮色。

（4) 用碘-碘化鉀溶液媒染1分鐘，傾去多余溶液。

（5）用中性脫色劑如乙醇（95%）或丙酮酸脫色30秒，革蘭氏陽性菌不被褪色而呈紫色，革蘭氏陰性菌被褪色而呈無色。酒精脫色為整個(gè)流程最關(guān)鍵的一步。

（6）用蕃紅染液或者沙黃復(fù)染30秒，革蘭氏陽性菌仍呈紫色，革蘭氏陰性菌則呈現(xiàn)紅色。革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌即被區(qū)別開。

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