賽爾瑞成技術團隊持續在細胞凍存領域進行研究工作,目前已開發出6款無血清細胞凍存液,均是通用型細胞凍存液,適用于凍存大部分動物及人的細胞系和原代細胞。賽爾瑞成自2018年推出第一款經典的無血清細胞凍存液以來,CRD系列無血清細胞凍存液因其過硬且穩定的產品質量,獲得了國內數百家實驗室和企業用戶的認可,廣泛服務于國內細胞生物學研究和應用。
賽爾瑞成無血清細胞凍存液系列產品發展史
◆ 2018年9月,賽爾瑞成第一款無血清細胞凍存液上市,命名Cellregen無血清細胞凍存液,此款產品為賽爾瑞成無血清細胞凍存液經典款,不含血清,DMSO含量為10%;
◆ 2020年5月,賽爾瑞成無血清低DMSO細胞凍存液上市,不含血清,DMSO含量為5%。并于2022年9月,獲得專利授權(一種無血清低 DMSO 細胞凍存液及其應用,專利號: ZL 2020 1 0307890.6)。
◆ 2021年8月,賽爾瑞成無血清無DMSO細胞凍存液上市,不含血清,不含DMSO,同時對三款無血清凍存液進行更名:
◆ 2023年3月,賽爾瑞成CRD10-A無血清細胞凍存液上市,不含血清,DMSO含量為10%;
◆ 2023年4月,賽爾瑞成重磅推出CRD000化學限定細胞凍存液 (無血清無DMSO無蛋白),不含血清,無DMSO,無蛋白;
◆ 2023年8月,賽爾瑞成CRD10Pro無血清細胞凍存液上市,不含血清, DMSO含量為10%,無蛋白。
共同特色
★ 不含血清、減少病毒、霉菌和支原體等的污染;
★ 成分明確,主要成分符合藥典標準,無批次間差異;
★ 特別配方,有效提高細胞凍存存活率及復蘇率;
★ 即用型,無需現配,即開即用;
★ 無需程序降溫,可-80℃冰箱/液氮保存;
★ 可原位凍存,比如雜交瘤細胞的亞克隆,可以減少工作量。
如何區分CRD系列無血清細胞凍存液
賽爾瑞成無血清細胞凍存液系列產品使用方法
凍存管凍存及復蘇方式
凍存方式:
選擇凍存處于對數生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。
1、按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于試管中。
2、按照培養細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數。(參考:5×105至5×106 cells/ml)。
3、取相當于所需細胞數的細胞懸浮液量,置于離心管中,離心收集培養細胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min)。移去離心管中的上清液。
4、加入適量無血清細胞凍存液于離心管中,使細胞濃度為5×105至5×106 cells/ml。緩慢混合均勻,制成細胞混合液。
5、將離心管中的細胞混合液分裝于已標示的冷凍保存管中。
6、直接將含細胞懸液的凍存管放入-80℃冰箱,冷凍保存。
7、若研究者需要液氮保存時,可先放入-80℃冰箱過夜后,再移至-196℃液氮罐。
復蘇方式:
1、從冰箱取出凍存細胞管,立即放入37℃水浴槽中快速解凍。
2、待凍存的細胞懸液完全融化后,立即加入1 ml細胞培養基于該冷凍管中與細胞混合,再將細胞混合液從凍存管中移入含有9 ml該細胞培養基的試管中,混合均勻。
3、離心收集培養細胞(參考離心條件:1,000~2,000 rpm,4℃,3~5 min),移去上清液。
4、清洗細胞,充分洗凈殘留凍存液。
5、加入適量新鮮培養基,使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后,將細胞混合液移至事先準備好的培養瓶中。
6、鏡檢后,研究者可根據各自方法和需要來進行細胞培養。
原位凍存及復蘇方式
凍存方式:
選擇凍存處于對數生長期的細胞有助于提高復蘇細胞存活率。
1、從培養狀態良好的細胞培養板中將培養基上清吸取干凈。
2、加入適量無血清細胞凍存液于培養孔板中,充分浸潤細胞。
3、蓋上蓋板,做好密封措施,防止染菌。
4、直接將含凍存液的細胞培養板放入-80℃冰箱,冷凍保存。
復蘇方式:
1、從冰箱取出凍存培養板,立即放入37℃水浴槽中快速解凍。
2、待凍存的細胞懸液完全融化后,輕輕吸去細胞凍存液,按照常規換液操作加入新鮮培養基繼續進行培養。
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