半制備色譜使用時的操作方法及應(yīng)用特點(diǎn)
半制備色譜是一種介于分析和制備之間的工具,用于制備中小量的純品。相對于制備色譜而言,它的操作更簡單、更快速,同時又具有比較高的純度和收率。原理基于液相色譜技術(shù)的一種分離方法。它的原理是將待分離的混合物通過固定在柱子中的分離材料進(jìn)行分離。待分離混合物按照其化學(xué)性質(zhì)在分離材料表面上發(fā)生吸附作用,不同化合物因其分子間作用力的差異,在分離材料表面停留的時間也不同,從而實(shí)現(xiàn)分離。
半制備色譜的操作方法:
1.樣品制備:首先需要將待分離的混合物溶于適當(dāng)?shù)娜軇┲校⑦M(jìn)行前處理,如過濾、提純、pH調(diào)節(jié)等。
2.色譜柱填充:將分離材料(例如硅膠)填充至色譜柱中,并在表面形成一個平坦的分離層。
3.樣品進(jìn)樣:將經(jīng)過前處理的樣品注入色譜柱頂端,并通過柱底不停地收集出流液。
4.按發(fā)展性質(zhì)分離:根據(jù)樣品的發(fā)展性質(zhì),選用不同的溶劑組合,實(shí)現(xiàn)化合物的分離。
5.分離產(chǎn)物收集:將分離出來的產(chǎn)物以適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行收集和處理,如凝膠過濾、濃縮、干燥等。
半制備色譜的應(yīng)用:
1.化學(xué)制品制備:可以用于化學(xué)制品的提純和制備。
2.藥物制備:也可以用于藥物的分離和制備。例如,利用色譜技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)對蛋白質(zhì)和多肽類藥物的提純和制備。
3.生物制品制備:在生物制品制備中也具有廣泛的應(yīng)用。例如,可以用于細(xì)胞培養(yǎng)中生長因子的提取和分離等。
4.食品分析:也可以用于食品中有機(jī)成分的分離和檢測,例如,提取和分離香料和色素類物質(zhì)。
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