簡介美國衛(wèi)生與公眾服務(wù)部（DHHS）與精神衛(wèi)生管理局（SAMHSA）規(guī)定尿液的測(cè)試程序。強(qiáng)制性的準(zhǔn)則要求一個(gè)實(shí)驗(yàn)室在報(bào)道一個(gè)尿樣為陽性前必須進(jìn)行對(duì)樣品進(jìn)行初測(cè)和復(fù)測(cè)兩次分析測(cè)試。初測(cè)是對(duì)五種化合物進(jìn)行免疫塞查（分別是：安非他命，苯環(huán)己哌啶）。免疫塞查包括了放射免疫檢定法（RIA），酶免疫分析法以及其他相關(guān)方法。免疫篩查成陽性的樣品在定兒子檢測(cè)中將進(jìn)行色譜分離和質(zhì)譜鑒定。SAMHSA 規(guī)定 PCP 的限值為 25ng/ml

尿液檢測(cè)的一般流程分為如下七個(gè)步驟：1. 在尿樣中加入氘代的內(nèi)標(biāo)化合物；2. 調(diào)節(jié)尿液的 pH 值；3. 水解尿液；4. 通過固相微萃取小柱（SFE）提取目標(biāo)化合物，蒸干；5. 衍生化提取液（除了 PCP），蒸干；6. 用有機(jī)溶劑溶解提取物；7. 取 1-3μl 注入氣質(zhì)聯(lián)用儀，用三個(gè)離子對(duì)目標(biāo)化合物進(jìn)行定性及定量檢測(cè)。

玻璃器皿所有的玻璃器皿，包括自動(dòng)進(jìn)樣器的進(jìn)樣小瓶和小體積內(nèi)置瓶都必須經(jīng)過硅烷化處理，以防止樣品吸附。所有的玻璃器皿用 10% 的二甲基二氯硅烷甲苯溶液浸泡 10min，再先后用甲醇和正己烷沖洗，最后吹干備用。試劑試樣乙酸，100 mM=2.86ml 冰醋酸溶解于 500ml 去離子水中。磷酸鹽緩沖液，100 mM pH6=1.7gNa2HPO4+12.14gNaH2PO4（調(diào)低 pH 值）。二 氯 甲 烷 / 異 丙 醇 / 氫 氧 化 銨（78:20:2） 萃 取 液=40ml 異丙醇 +4ml 氫氧化銨 +156ml 二氯甲烷，臨用現(xiàn)配。標(biāo)準(zhǔn)品和氘代內(nèi)標(biāo)物由 Cerillant®(Round Rock, TX)提供。內(nèi)標(biāo)物為：d5-PCP

儀器氣相色譜儀：PerkinElmer®Clarus®680 GC。進(jìn)樣口：毛細(xì)管進(jìn)樣口，壓力脈沖不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣口溫度：250℃。進(jìn)樣口襯管：Siltek ™帶玻璃毛（貨號(hào)為 N6502010）。氦氣柱流速：2ml/min。柱溫：100℃保持 0.5min 然后以 20℃ /min 升到 310℃，保持 4min。

壓力脈沖不分流進(jìn)樣這個(gè)過程是在進(jìn)樣的過程中提高進(jìn)樣壓力，以將更多的樣品在短時(shí)間內(nèi)推入到色譜柱中，然后降低壓力以維持正常色譜分離流量。這個(gè)過時(shí)是通過以下時(shí)間事件來完成的：CAR2 5 mL/min -0.71 min ( 進(jìn)樣前升高壓力 ).SPL2 0 -0.70 min ( 關(guān)閉進(jìn)樣口做不分流進(jìn)樣 ).CAR2 2 mL/min 0.7 min ( 進(jìn)樣后恢復(fù)正常流量 ).SPL2 50 0.8 min ( 進(jìn)樣后打開分流口 ).質(zhì)譜儀 PerkinElmer Clarus SQ 8 GC/MS, 具有 255L/S分子渦輪泵，EI 源。所有數(shù)據(jù)采用選擇離子模式（SIM），每個(gè)離子掃描時(shí)間為 20-30ms。選擇一個(gè)主要離子進(jìn)行定性定量檢測(cè)。量選擇兩個(gè)附加離子輔助進(jìn)行定性檢測(cè)。與標(biāo)準(zhǔn)庫相比，三個(gè)檢測(cè)離子色譜圖中頂點(diǎn)保留時(shí)間數(shù)不得超過 ±2scans。離子豐度比誤差不得超過20%。氘代內(nèi)標(biāo)物可以用兩個(gè)離子，分別為一個(gè)定量主離子和頤個(gè)定性離子。SIM 離子：PCP：200,242,186d5-PCP：205,248RT: 5.17min

固相萃取目標(biāo)化合物是通過固相萃取（SPE）從尿液中提取得到的。化合物在尿液通過固相柱時(shí)被吸附保留在固定相上，然后沖洗固定相以洗脫鹽分和其他雜質(zhì)。最后用更強(qiáng)洗脫能力的溶液洗脫下目標(biāo)化合物。固相萃取柱為：C18-S 200mg/3ml 50u（CAT.NO.N9306462）。

試驗(yàn)萃 取：1-2ml 尿 液 +ISTD+2ml 100 mM 磷 酸 鹽 緩 沖 液（pH6）。SPE 柱提取：用 3ml 甲醇沖洗小柱，然后用 3ml 去離子水，最后用 1ml 磷酸鹽緩沖液（pH6）。提取樣品：用 3ml 去離子水沖洗小柱，然后用 1ml 1Mm乙酸溶液沖洗，最后用 1ml 甲醇。洗脫：用二氯甲烷 / 異丙醇 / 氫氧化銨（78:20:2）萃取液洗脫，并用錐形瓶收集洗脫液。在 50 ℃ 以 下 蒸 干， 檢 測(cè) PCP 不 需 要 進(jìn) 行 衍 生。 用100μL 乙酸乙酯溶解后轉(zhuǎn)移到小體積進(jìn)樣平內(nèi)襯管中，進(jìn)樣 1μL。

線性范圍10% 限度（2.5ng/ml），40% 限度（10ng/ml），100% 限度（25ng/ml），125% 限度（31.25ng/ml），500% 限度（125ng/ml），1000% 限度（250ng/ml）。

結(jié)論本應(yīng)用采用 GC/MS 對(duì)尿液中 PCP 進(jìn)行分析，測(cè)得定量限為 2.5ng/ml，檢測(cè)限為小于 1.0ng/ml。實(shí)驗(yàn)室可以采用相同的方法對(duì)樣品進(jìn)行非標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)。快速樣品檢測(cè)可以通過采用更短的氣相色譜柱，更快的流速，更短的冷卻時(shí)間和自動(dòng)進(jìn)樣器提前預(yù)洗滌控制來實(shí)現(xiàn)。珀金埃爾默公司的 Clarus SQ 8 GC/MS 系統(tǒng)在選擇離子模式中提供了高靈敏度的可靠的結(jié)果。Turbomass GC/MS 軟件按要求可以提供三個(gè)離子的檢測(cè)數(shù)據(jù)的檢測(cè)報(bào)告模板，簡單易懂。圖二是一個(gè)樣品定制的三離子比報(bào)告。