手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
所分離的顆粒大小和密度相差較大:常速、;若從樣品液中分離2種以上大小和密度不同的顆粒：差速離心;超速離心:差速離心法和密度梯度離心法，后者又分速率區(qū)帶離心和等密度離心。
1、 差速離心
采用不同離心速度與時間，使不同沉降速度的顆粒分批分離；
差速離心法：
原理：采用逐漸增加或低速和高速交替進行離心，使沉降速度不同的顆粒在不同的分離速度及不同的離心時間下分批分離的方法，稱為差速離心法。
當(dāng)以一定離心力在一定的離心時間內(nèi)進行離心時，在離心管底部就會得到最大和最重顆粒的沉淀，分出的上清液在加上轉(zhuǎn)速下再進行離心，又得到第二部分較大、較重顆粒的“沉淀”及含小和輕顆粒“上清液”，如此，多次離心處理，即能把液體中的不同顆粒較好分開。這時所得沉淀是不純的，需經(jīng)再懸浮和再離心（2—3次），才能得到較純顆粒。
常用于從組織勻漿中分離細胞和病毒。
2、 密度梯度
又稱速率—區(qū)帶離心,沉降系數(shù)較接近的物質(zhì)分離的方法；
原理：不同顆粒之間存在沉降系數(shù)差時，在一定離心力作用下，顆粒各自以一定速度沉降，在密度梯度不同區(qū)域上形成區(qū)帶的方法。
介質(zhì)梯度應(yīng)預(yù)先形成，介質(zhì)的最大密度要小于所有樣品顆粒的密度。常用的有蔗糖、甘油；
密度梯度液的制備用梯度混合器，形成由管口到管底逐步升高的密度梯度；
操作：離心前將樣品小心鋪放在密度梯度溶液表面，離心形成區(qū)帶。離心后不同大小、不同形狀、有一定沉降系數(shù)差異的顆粒在密度梯度液中形成若干條界面清楚的不連續(xù)區(qū)帶；
可用來分離核酸、蛋白質(zhì)、核糖體亞基及其它成分。
3、
原理：當(dāng)不同顆粒存在浮力密度差時，在離心力場下，在密度梯度介質(zhì)中，顆粒或向下沉降，或向上浮起，一直移動到與它們各自的密度恰好相等的位置上形成區(qū)帶，從而使不同浮力密度的物質(zhì)得到分離；
區(qū)別:離心介質(zhì)、密度梯度范圍與密度梯度離心不同，欲分離的顆粒密度處于離心介質(zhì)密度范圍內(nèi)。
介質(zhì)有：氯化銫、硫酸銫、溴化銫、三碘苯衍生物等。
操作：介質(zhì)溶液與樣品液混合均勻，足夠時間離心。
介質(zhì)梯度不需預(yù)先制備，離心時把密度均一的介質(zhì)液和樣品混合后裝入離心管，通過離心形成梯度，讓顆粒在梯度中進行再分配。常用來分離提取核酸、亞細胞器和質(zhì)粒。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心