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寵物檢測熒光PCR是一種基于DNA復制和擴增的技術，其適用于檢測特定序列的DNA，并從中獲得更多或全部的DNA。PCR可以在短時間內產生大量純的、具有特定序列的DNA分子，是現代分子生物學的基礎技術之一。而熒光PCR則是一種在傳統聚合酶鏈反應的基礎上加入熒光探針以實現更準確的檢測方法。
原理是這樣的：先需要收集需要檢測的寵物樣本，如口腔拭子、血液或組織等樣本。然后需要使用熱解法將其中的DNA裂解，使其變為單鏈。接著添加兩個特異性引物單元，即“前向引物”和“反向引物”，并加入熒光探針，該探針含有一個熒光染料和一個淬滅染料，可以與細胞外核酸(GC)結合。當引物與模板相互作用時，在3'端區域上進行擴增，此時探頭發生水解，導致熒光染料從淬滅染料釋放，并且發生熒光信號釋放，以此來檢測PCR反應產物。可以通過實驗室設備觀察PCR反應體系中熒光信號變化的趨勢，即可對樣品DNA進行定量或定性分析。
利用特定引物擴增所有目標區域內存在的DNA，引物的設計根據目標序列的基本信息選擇合適的引物序列，使其在PCR過程中，能夠按照特定規則穩定地結合到待擴增模板的特定位置上。與普通PCR不同，熒光PCR選用帶有熒光生物素標簽的引物，可以將擴增的目標串聯片段和引物結合成一個分子。通過Real-timePCR系統可以同時進行擴增反應和融合曲線分析。這樣，在后期的熒光檢測過程中，就可以對所擴增目標片段的數量進行準確的定量。
寵物檢測熒光PCR技術的其他優勢還包括：
高度靈敏性：可以從非常小的樣本量開始擴增，探測樣本中確定污染，擴增低拷貝的模版。
高速度：相比傳統PCR技術，不需要進行后續電泳與染色分析，可以在更短的時間內完成檢測。
高熱穩定性引物和熒光探針被特意設計，確保了其在高溫下不會失活或降解。
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