BCA(bicinchonininc acid)與二價銅離子的硫酸銅等其他試劑組成的 試劑 ,混合一起即成為蘋果綠,即BCA工作試劑。在堿性條件下,BCA與蛋白質結合時,蛋白質將Cu2+ 還原為Cu+ ,一個Cu+ 螯合二個BCA分子,工作試劑由原來的蘋果綠形成紫色復合物,最大光吸收強度與蛋白質濃度成正比。
優缺點
1. 操作簡單,快速,45分鐘內完成測定,比經典的Lowary法快4倍且更加方便;
2.準確靈敏,試劑穩定性好,BCA試劑的蛋白質測定范圍是20-2000μg/ml
3.經濟實用,除 試管外,測定可在微板孔中就進行,大大節約樣品和試劑用量;
4.抗試劑干擾能力比較強,如去垢劑,尿素等均無影響
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