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非洲豬瘟PCR儀(African Swine Fever PCR Analyzer)是一種集DNA特異性擴(kuò)增與檢測(cè)于一體的實(shí)驗(yàn)室分析設(shè)備。利用引物擴(kuò)增技術(shù)來(lái)檢測(cè)因非洲豬瘟病毒產(chǎn)生的目標(biāo)DNA片段。在使用時(shí)，需要注意如何選擇合適的引物以及正確的操作流程和步驟。該儀器可用于從血樣、組織、糞便、尿液等多種來(lái)源中檢測(cè)非洲豬瘟病毒的存在，且其檢測(cè)結(jié)果具有快速、準(zhǔn)確、靈敏等特點(diǎn)。屬于利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)技術(shù)來(lái)檢測(cè)目標(biāo)序列的檢測(cè)儀器之一。將待檢測(cè)的DNA樣本與引物、縮合酶及核酸酶自由水混合放入試管內(nèi)，并通過(guò)恒定溫度四次循環(huán)擴(kuò)增。其中每個(gè)循環(huán)包括模板退火、引物連接、DNA聚合和擴(kuò)展階段。所需的引物為兩種，即左、右引物，二者體積成一比例計(jì)算加入；縮合酶與核酸酶是配位縮合酶及回轉(zhuǎn)酶。配位縮合酶作用于引物5'-端的縮合反應(yīng)，解鎖并啟動(dòng)雙鏈DNA擴(kuò)增的階段(即退火和連接)。而回轉(zhuǎn)酶能夠解旋雙鏈、釋放目標(biāo)序列并啟動(dòng)DNA合成。
實(shí)際應(yīng)用中，非洲豬瘟PCR儀的檢測(cè)過(guò)程可以分為三個(gè)主要部分，即樣品制備、擴(kuò)增反應(yīng)和結(jié)果分析。在樣品制備階段，需要從目標(biāo)組織、血液等樣本中提取出目標(biāo)DNA；而擴(kuò)增反應(yīng)階段則需要將上述提取到的DNA進(jìn)行聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，并通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增出目標(biāo)片段；在結(jié)果分析階段，則可通過(guò)熒光信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)PCR反應(yīng)產(chǎn)物的熒光強(qiáng)度值，以識(shí)別是否存在非洲豬瘟病毒(ASFV)。
在具體的操作過(guò)程中，操作人員需要按照非洲豬瘟PCR儀操作步驟進(jìn)行相應(yīng)的設(shè)定，包括樣品裝載、數(shù)據(jù)輸入及儀器開(kāi)機(jī)等幾個(gè)主要流程。此外，在使用基于PCR技術(shù)的檢測(cè)工具時(shí)，還需要注意如何選擇引物合適的生化特性、協(xié)同作用、PE(polyethylene)交聯(lián)改變溫度敏感性、HDA (Hyper-dimensional Amplification)雜交寡核苷酸光敏化等多個(gè)操作因素。這些因素的掌握，不僅會(huì)影響檢測(cè)效率、準(zhǔn)確性和方便性，還會(huì)直接影響食品安全標(biāo)準(zhǔn)。
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