高效液相色譜儀(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)是一種廣泛應用于各個領域的分析技術,其工作原理是基于樣品在固定載體上的分離和純化。HPLC采用了流動相和固定相相互作用的分離機制,能夠將樣品中不同成分隔離開來。其中,固定相主要分為分子篩、SPE固相萃取柱、反相柱、正相柱、離子交換柱等類型。流動相則通常為有機溶劑、水或緩沖液等。
高效液相色譜儀的樣品混合物被噴入固定相上的柱子中,隨著流動相的不斷流動,樣品混合物逐漸被固定相表面吸附或溶解,并不斷與固定相交換。而不同成分的吸附和溶解速度也不同,這樣不同成分在流動相的推動下,就會分離開來,依次出現在柱床傳感器處,形成各自的峰。峰的高度和面積反映了樣品中各組分的相對含量和純度。HPLC可以采取吸附譜和反射譜兩種方式進行檢測。
使用環境的要求:
1.安全性:高效液相色譜儀使用有機溶劑和流動相,這種液體在使用和操作過程中燃燒性、揮發性都很強,特別容易引發火災或爆炸。因此,必須在安全通風的實驗室環境下操作,避免點火、電氣火災等危險。
2.穩定性:涉及到流動相的壓力控制、流量控制、柱溫控制等多種參數,使用環境需要穩定性高,電力和水邏輯穩定、溫度控制恒定等。
3.凈化度:工作所需的樣品純度通常要求高,和其他較為復雜的分析儀器相比,取樣、試劑、儀器本身需要保持一定的凈化度。
4.系統兼容性:不同的HPLC類型、不同的柱子、流動相和探測器等均存在系統兼容性問題。因此使用方在選擇配套設備時需要注意設備兼容性。
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