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蘭格實驗室注射泵助理微流控細胞膜電穿孔技術實現分子遞送

來源:上海莫研機電設備有限公司   2023年02月28日 14:33  

向細胞內遞送DNA探針和質粒等功能分子來探索細胞內的分子機制與操控細胞命運,一直是生物醫學領域目標工作。從小分子到如今火熱的核酸mRNA疫苗遞送都離不開藥物遞送技術。然而,由于大多數外源功能分子都帶有負電荷,無法直接通過同樣帶有負電荷的細胞膜,阻礙了細胞內分子機制的探索與細胞功能的改造。


基于微流控芯片的細胞電穿孔技術

目前,生物醫學已開發了多種方法輔助功能分子進入到細胞內。其中,電穿孔技術作為一種通用的細胞內遞送工具,指在外部增加短時強電脈沖時,細胞膜會形成瞬時微孔,大多數外源功能分子可以進出細胞。  

近年來,隨著微流控技術的發展,基于微流控芯片的細胞電穿孔技術提高了傳統電穿孔的效率。微流控芯片中微電極的間距短,產生同樣的電場強度只需幾伏至十幾伏的電壓,避免了傳統電穿孔中超高壓帶來的各種問題。同時,消耗樣品及試劑更少,降低實驗成本。 

此外,在連續流動環境中細胞膜通透性的阻抗檢測達到了更高的靈敏度。電穿孔技術在微流控相助下遞送效率、劑量均勻性和細胞安全性方面均獲得了顯著提高。

應用案例


美國麻省理工學院機械工程院采用HeLa細胞進行電穿孔實驗,由于電穿孔產生的細胞膜孔洞非常微小且不穩定,因此采用綠色熒光蛋白進行電穿孔的表征,利用細胞內的熒光強度程度反映電穿孔效果。

為了更好記錄電穿孔的完整動態過程以及提高實驗效率,設計了基于微流控細胞遞送平臺。在交流電壓下有效導入熒光蛋白的活細胞超過總數50%,保持高達90%的細胞活力,成功實現了細胞電穿孔。


該系統主要包括纖維狀摩擦電納米發電機(FS-TENG)、基于納米通道的器件、微流控芯片和微量注射泵。

微量注射泵再微流控中作為動力源,通過機械裝置推動注射器,可實現高精度、平穩的液體傳輸。該實驗過程中采用了蘭格的LSP02-18注射泵以200uL/min輸送低電導率細胞懸液,有效保護細胞的同時進一步輔助細胞電穿孔,實現了細胞電穿孔動態過程的實時跟蹤。

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