快速轉膜液是一種高達20倍濃度的高效轉膜液,用于WesternBlot濕轉法轉膜,能高效快速地將蛋白轉移到印跡膜(PVDF或硝纖膜)上。不使用甲醇,能在15-30分鐘內完成轉膜過程。
產品特色:
1、高效安全:不使用甲醇,減少有毒試劑使用。
2、快速穩定:能在15-30分鐘完成轉膜過程,產熱量小,減少蛋白損失。
3、兼容性好:兼容Laemmli膠,預制膠,FastPAGE,Bis-Tris膠等多種凝膠。
快速轉膜液操作步驟:
1、1X快速轉膜液的配制(1000ml):取50ml快速轉膜液(20X)+850ml去離子水+100ml無水乙醇。
2、做好轉印三明治結構,然后轉移至電泳槽中,設定恒流400mA,電泳時間25-30分鐘完成蛋白轉膜。
快速轉膜液使用要注意:
(1)PVDF膜使用前要用無水甲醇潤濕30秒以上。
(2)轉印電流建議設定恒流400mA,一般25-30分鐘可以將150kD以下蛋白可以轉印;小于100kD蛋白20分鐘即可可以轉印;對于大于150kD蛋白,建議延長5-10分鐘。
(3)凝膠的濃度影響轉印的效率,對于膠濃度7.5%,20分鐘即可完成轉印;對于膠濃度10%,25-30分鐘即可完成轉印;對于膠濃度大于10%,建議延長5-10分鐘
(4)40分鐘時間內轉膜不需要放冰上,轉膜槽內外都不可放冰預冷,否則會影響效率。
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