快速轉膜液是一種粉末形態的安全無毒的用于濕法快速轉膜的緩沖液。使用本快速轉膜液時,在400mA恒流轉膜約20-25分鐘即可將聚丙烯酰胺凝膠上的蛋白轉移至PVDF膜或硝酸纖維素膜(NC膜)等印跡膜上,并且產熱少,轉膜效果好。而相同的條件下使用傳統的轉膜液需要轉膜更長時間。本產品為預混粉末安全無毒害,使用前需要用水和乙醇配制,但無需調節pH值。本產品不含有毒有害組分,也無需使用劇毒的甲醇等試劑。
下面說說快速轉膜液的操作步驟:
1、1X快速轉膜液的配制(1000ml):取50ml快速轉膜液(20X)+850ml去離子水+100ml無水乙醇2:做好轉印三明治結構,然后轉移至電泳槽中,設定恒流400mA,電泳時間25-30分鐘完成蛋白轉膜。注意:PVDF膜使用前要用無水甲醇潤濕30秒以上。
2、轉印電流建議設定恒流400mA,一般25-30分鐘可以將150kD以下蛋白全轉印;小于100kD蛋白20分鐘即可全轉印;對于大于150kD蛋白,建議延長5-10分鐘。
3、凝膠的濃度影響轉印的效率,對于膠濃度7.5%,20分鐘即可完成轉印;對于膠濃度10%,25-30分鐘即可完成轉印;對于膠濃度大于10%,建議延長5-10分鐘
4、40分鐘時間內轉膜不需要放冰上,轉膜槽內外都不可放冰預冷,否則會影響效率。
本快速轉膜液產熱少,外槽無須冰浴,僅用轉膜槽中的內置冰盒進行降溫即可。本快速轉膜液使用便捷,無需調節pH值。本產品適合手工配制的Tris-Gly和Hepes等緩沖系統的SDS-PAGE凝膠的轉膜,也適合Tris-Gly、Hepes和Bis-Tris系統等預制膠的轉膜。使用后轉膜液可以回收,回收后可以再使用1-2次。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。