1、 血清管細(xì)胞在常溫運(yùn)送到達(dá)后,請?jiān)谑盏郊?xì)胞后,先檢查包裝是否完整,有無破損漏液的情況,并核對細(xì)胞管上的標(biāo)簽信息,細(xì)胞管數(shù)是否與發(fā)貨清單一致。如有異常情況,請及時與我們聯(lián)系。
2、收到細(xì)胞后請盡快進(jìn)行處理,如不能及時處理,請將細(xì)胞放至常溫環(huán)境,通常15-25℃為佳,并盡量在24 h內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)。否則細(xì)胞狀態(tài)和存活率將會受到一定的影響。血清管懸液可能會呈現(xiàn)一定程度的渾濁狀態(tài),這屬于正常現(xiàn)象,請放心操作。
3、將血清管外壁進(jìn)行常規(guī)消毒后,在超凈臺內(nèi)小心開蓋,盡量避免氣泡溢出,輕柔吹打數(shù)次,轉(zhuǎn)移至15 mL離心管內(nèi)。
4、吸取1 mL培養(yǎng)基清洗血清管內(nèi)壁,同樣轉(zhuǎn)移至15mL管,并吹打均勻。
5、取20 μL細(xì)胞懸液至EP管,臺盼藍(lán)染色并計(jì)數(shù),記錄細(xì)胞數(shù)量和存活率。如有異常請及時與我們聯(lián)系。
6、250 g離心4 min,收集細(xì)胞沉淀,并接種至合適大小的培養(yǎng)器皿中,放置于培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。
7、24 h后顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),觀察細(xì)胞時請拍100×、200×各2-3張照片進(jìn)行留存,所拍照片應(yīng)該盡量清晰。,并根據(jù)匯合度繼續(xù)培養(yǎng)或消化傳代。
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