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影響紫外分光光度計讀數不穩定的根本原因應該有兩類：一類是能量降低，信噪比下降，這個可能性比較大；另一類是信號接收和處理故障。
具體如下：
1 能量降低
1.1 比色皿：
如果是在400nm以下波長測量，需使用石英比色皿，假如使用普通玻璃比色皿會吸收大部分的紫外能量。還有比色皿一般有光面和毛面之分，毛面是手捏的，光面是對正光路的。
1.2 樣品架：
檢查樣品架是否在正確的槽位上，光是否全部照在比色皿上。方法是把波長設定到550nm左右，這時是比較明亮的黃綠色光，在樣品室內用個小紙片擋下就能看到光斑。這個方法也能檢測可見區的光源是否正常，濾光盤及波長驅動是否正常。
1.3 空白樣品：
樣品室不放任何東西對空氣調零，看是否穩定。如果穩定的話，應該是空白樣品本身吸光度太高了。方法是先對空氣調零，然后把空白樣品放入光路中看讀數。如果讀數很大，例如接近3A，則不可用。
1.4 光源：
先確認分析波長值，一般紫外可見有2個光源，紫外區用氘燈，可見區用鎢燈，切換點一般在340nm。鎢燈光較為明亮刺眼，氘燈光偏青紫色。如果儀器后面有透光窗口可以直接看，如果沒有的話，需要打開外殼，打開燈室罩。光源都是用壽命的，能量變弱或干脆不亮了，要換燈。也有比較小的可能是光源供電電路故障，例如電源老化后可能導致無法正常點亮氘燈。
1.5 光路：
看光路是否偏了，可以把波長設定到550nm左右，觀察樣品室內有無黃綠色光線，光斑能否正確照在接收器窗口上。確認燈室內光源光斑是否正確照在單色器入狹縫上，確認光路中有無雜物擋住。確認單色器內反射鏡、透鏡、光柵、濾光片等是否發霉或積滿灰塵，這個需要廠家才能處理。
1.6 驅動電路故障：
例如濾光盤驅動異常，導致濾光片用錯或者干脆光路被遮擋。一般廠家或專業人員處理。
2 信號接收和處理故障
接收器(例如光電池或者光電倍增管)、放大電路、AD轉換電路等都有可能。這類問題一般由廠家或專業人員處理，這里不詳細說明了。
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