流式細胞儀(Flow cytometer )是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據預選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來。多數流式細胞計是一種零分辨率的儀器,它只能測量一個細胞的諸如總核酸量,總蛋白量等指標,而不能鑒別和測出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是說,它的細節 分辨率為零。
BD 流式細胞儀中激光產生的光被樣品中的細胞散射,由檢測器測量,然后轉換為可以分析和測量的信號。本設備所采用的技術是一種用于分析細胞的具有多種應用的技術,包括細胞計數、表型分析、細胞周期評估和生存力檢測等不同應用。
BD 流式細胞儀儀器主要由哪四個系統組成:
1.流動室和液流系統:
流動室由樣品管、鞘液管和噴嘴等組成。將懸浮分散的單細胞懸液,經特異性熒光染料染色后,放入樣品管。在氣體壓力下,樣品管中的單細胞懸液進入BD 流式細胞儀的流動室,鞘液約束細胞排列成單列由流動室的噴嘴噴出,成為細胞液柱。
2.光電管和檢測系統:
細胞所產生的熒光通過光電轉換器轉變成電信號而進行測量。這些信號分別被成90℃角方向放置的光電倍增熒光檢測器和前向角放置的光電二極管檢測器接收,經過轉換器轉換為電子信號。
3.激光源和光學系統:
經特異熒光染色的細胞需要合適的光源照射激發才能發出熒光供收集檢測。細胞液柱與水平方向的入射激光束垂直相交,相交點稱為測量區。通過測量區的細胞受激光照射后發出熒光,同時產生光散射。
4.計算機和分析系統:
經轉換后的電信號被送往計算機分析器。計算機通過相應的軟件儲存、計算、分析,就可以得到細胞的大小和活性、核酸含量等理化指標。
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