熒光顯微鏡是利用特定波長的激發光照射被檢物體產生熒光進行鏡檢的顯微光學觀測技術，是醫院科研、病理、檢驗等部門常用的醫用光學儀器之一。有些物質受紫外線照射后可發熒光，另有一些物質需要用熒光染料或熒光抗體染色后，經紫外線照射亦可發熒光，可以觀察到普通顯微鏡看不到的細節，大多數實驗室都有配備高質量或者常規的顯微成像系統，但是調整熒光，校正難度較高，因此需要了解熒光顯微鏡激發熒光的方式。

按光的波長范圍分為UV激發法(使用紫外線照明法)和BV激發法(使用藍紫光)兩種。

UV激發是用短于400nm紫外光進行激發。該法不存在可見的激發光，所以被觀察的熒光呈現該染料固有的熒光，容易判別標本上的特異熒光和背景組織的自身熒光。

BV激發是以404nm、434nm為中心的由紫外至藍光進行激發。適合使用藍光照射標本，用藍光作為激發光，熒光色素的吸收效率較高，可得到較明亮的圖像。

BV激發時要注意以下2點：

①熒光顯微鏡的截止濾光片要使用可*阻斷藍光并可充分通過所需綠、黃熒光的濾光片；

②500nm以下的熒光無法看到，而500nm以上會使整個圖像顯黃色。

因此，熒光顯微鏡的照明可根據聚光器的構造和激發光的波長按以下三點考慮。

①從熒光像的反差要求來看，UV激發暗場聚光器照明。
②以像的亮度來考慮，BV激發濾光片暗場觀察效率很高。

③UV激發濾光片暗場觀察和BV激發暗場聚光器照明的特性，可看作介于這兩種照明方法之間，但前者濾光片暗場的性質較強，顯示圖像較明亮，反差小；后者因保留暗場光路的性質，故顯示圖像較暗，而反差有所改善。當實際使用熒光顯微鏡時，應采用合適標本要求的照明法進行觀察。

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