牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin, BSA)是牛血清中的一種球蛋白,又稱第五組分(需要注意的是,第五組分并不是BSA的一種組份,而是Edwin J. Cohn教授早期從血液中通過特定的分離技術得到5種組份,其中第五種就是白蛋白)
一、主要成分:
1、蛋白質
是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白,球蛋白。纖維粘連素細胞促進細胞附著;α2巨球蛋白抑制胰蛋白酶的作用;胎牛血清中含胎球蛋白促細胞附著;轉鐵蛋白能結合鐵離子,減少其毒性和被細胞利用。
2、多肽
血小板促生長因子能促細胞分裂,是多肽家庭的主要成員之一,是主要的促細胞增殖因子;成纖維細胞生長因子、表皮細胞生長因子、神經細胞生長因子等,血清中含量雖很少,但對細胞生長也有一定作用。
3、激素
激素對細胞的作用是多方面的。
胰島素:促進細胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細胞分裂有關。
類胰島素生長因子:能與細胞表達的胰島素受體結合,從而有胰島素同樣的作用。
促生長激素:促細胞增殖效應。
4、其他成份
氨基酸、葡萄糖、酮酸等對多種營養成分的合成培養基意義不大。與蛋白相結合狀態的微量元素對細胞培養有意義。
二、作用:
BSA一般做為穩定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應液中,因為有些酶在低濃度下不穩定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保護”或“載體”作用,不少酶類添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會受到什么影響。對多數底物DNA而言,BSA可以使酶切更*,并可實現重復切割。在37℃,酶切反應超過1h時,BSA可以使酶更加穩定,因為在不含BSA的反應緩沖液中,許多限制性內切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內切酶活性的金屬離子和其它化學物質。
緩沖液
1.BSA是酶的穩定劑,防止酶的分解和非特異性吸附;
2.BSA能減輕有些酶的變性,能減輕有些不利環境因素如加熱,表面張力及化學因素引起的變性的,可能是因為它結構中有17個二硫鍵,和一個巰基,巰基的化學反應很活潑,二硫鍵有抗氧化還原的作用,因此可與多種陽離子,陰離子和小分子結合;
3.BSA能防止酶吸附到管壁而損失。
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