染色液是適用于所有常見細胞和組織細胞核染色的染色液。可以直接用于固定細胞或組織的細胞核染色。是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料。和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生比自身強20多倍的熒光。和EB相比,對雙鏈DNA的染色靈敏度要高很多倍。染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。
染色液的使用說明:
1、將涂片加熱固定,滴加石炭酸品紅染色液,徐徐加熱至蒸氣出現(xiàn),但切不可使沸騰。染色如因蒸發(fā)減少時,應隨時添加。染5分鐘,傾去剩余染液,水洗。
2、滴加3%鹽酸-乙醇溶液脫色,直至無紅色脫落為止,水洗。
3、滴加呂氏堿性美藍溶液復染30秒~1分鐘,水洗,待干鏡檢。
染色液的操作步驟:
1、按實驗具體要求操作或參考下列革蘭氏染色的方法。
2、涂片:取待檢細菌,于載玻片中央涂成薄層或者在載玻片上滴加少許無菌水,取菌與水混合均勻,涂成薄層。
3、干燥:涂片后在室溫下自然干燥,也可在酒精燈上略加溫,使之迅速干燥。
4、固定:手持載玻片一端,標本面朝上,在酒精燈的火焰外側(cè)快速來回移動。
5、初染:滴加結(jié)晶紫染色液染色,清水沖洗去染色液。
6、媒染:滴加碘液,并覆蓋載玻片室溫放置,水洗。
7、脫色:滴加脫色液搖動,直至流下的脫色液不出現(xiàn)紫色為止,立即用水沖去脫色液,終止反應。
8、復染:滴加沙黃染色液染色,水洗。
9、干燥。鏡檢:置油鏡觀察。
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