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滬鼎生物|怎樣進行細胞復蘇?

來源:上海滬鼎生物科技有限公司   2022年05月27日 16:29  

我公司經營生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品,致力于向國內生命科學研究人員提供產品和服務。我們代理和經銷的分子生物學試劑、生化試劑、免疫試劑、細胞培養試劑、制藥工業原料、實驗儀器與消耗品、臨床診斷產品等,已被廣泛應用于生命科學基礎與開發研究、制藥、疾病診斷、人口與健康、生物技術等諸多領域。我們的客戶遍布大學、研究所、醫院、制藥公司、生物技術公司和工業等單位。


細胞復蘇的具體操作:


一. 實驗前準備:


1.將水浴鍋預熱至37℃


2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。


3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養瓶等等。



二.取出凍存管:


1.根據細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。


2.從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。



三.迅速解凍:


1.迅速將凍存管投入到已經預熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。


2.約1-2min后凍存管內液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內。



四.平衡離心:


用架盤天平平衡后,放入離心機中3000r/min 離心3min



五.制備細胞懸液:


1.吸棄上清液。


2.向離心管內加入10ml培養液,吹打制成細胞懸液。



六.細胞計數:


細胞濃度以5×105/ml為宜。



七.細胞封瓶


培養細胞將復合細胞計數要求的細胞懸液分裝入培養瓶內,將培養瓶放入37℃和5%CO2的培養箱內2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續培養培養,換液的時間由細胞情況而定。


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